Мікробіологія – стафілококи. Мікробіологічна діагностика стафілококових інфекцій

Надіслати свою гарну роботу до бази знань просто. Використовуйте форму нижче

Студенти, аспіранти, молоді вчені, які використовують базу знань у своєму навчанні та роботі, будуть вам дуже вдячні.

Розміщено на http://www.allbest.ru

Вступ

У другій половині XX століття патогенні стафілококи, витіснивши багато мікроорганізмів, стали провідними збудниками різноманітних захворювань, що важко протікають.

До них відносяться пневмонії, абсцеси легень, менінгіти, перитоніти, сепсис, ендокардити, токсичні ентерити, запалення сечового тракту, гінекологічні захворювання, гнійні ускладнення після поранень та операцій, отити, післяпологові мастити та інші. Патогенний стафілокок може викликати і харчові отруєння, що виявляються як епідемічних спалахів.

Актуальність вивчення стафілококових інфекцій важко переоцінити. У зв'язку з повсюдним зростанням стафілококових інфекцій дослідження лабораторної діагностики та профілактики стафілококових захворювань набуває великого значення.

У природі - в живому світі, навколишньому середовищі, повітрі - дуже поширені хвороботворні (патогенні) і нешкідливі (непатогенні) різновиди стафілококів. Патогенний стафілокок є санітарно-показовим мікроорганізмом повітря.

Найважче і важливе у дослідженні стафілокока, як патогенного, так і не патогенного є, є час для зростання культури. Для того, щоб виділити чисту культуру стафілокока потрібно від 2-3 днів.

Мета роботи полягає у вивченні збудника стафілокока та їх виявлення у мікробіологічній діагностиці.

· Вивчити морфологію стафілококів.

· Вивчити культуральні властивості стафілококів.

· Вивчити біохімічні властивості стафілококів.

· Вивчити токсиноутворення та антигенну структуру стафілококів.

· Вивчити стійкість стафілококів.

· Охарактеризувати патогенез та клініку.

· Охарактеризувати класифікацію.

· Проаналізувати стафілокок гемолітичний.

· Проаналізувати стафілокок епідермальний.

· Проаналізувати стафілокок сапрофітний.

· Проаналізувати золотистий стафілокок.

· Розповісти про методи лабораторної діагностики.

Історична довідка.

Патогенний стафілокок (Staphylococcus aureus) виявлений Р. Кохом (1878), виділений з гною фурункула Л. Пастером (1880), описаний як збудник багатьох нагноєльних процесів А. Огюстоном (1881), докладно вивчений Ф. Розенбахок (18) від грецького словосполучення «гроно винограду».

1. Характеристика стафілококів

Стафілокок - це бактерії сімейства Micrococcaceae.

Небезпека даних мікроорганізмів полягає в тому, що вони виробляють токсини та ферменти, які є патогенними для клітин та порушують їхню життєдіяльність. Бактерії руйнівно впливають на сполучні тканини, шкіру та підшкірну клітковину. Вони викликають ряд найнебезпечніших захворюваньсеред яких - сепсис, токсичний шок та інші. Часто саме зі стафілококовою інфекцією пов'язують ускладнення після різних хвороб.

1.1 Морфологічні особливості

Всі види стафілококів мають кулясту форму. У різних джерелах їх розмір різний. Середнє значення розміру від 0,5 до 2 мкм. У мазках їх культур розташовуються як грон винограду. У патологічному матеріалі вони можуть виявлятися у вигляді окремих одиночних коків, диплококів, коротких ланцюжків. Суперечку не утворюють, джгутиків не мають. У деяких штамів стафілококів виявляють капсулу. Під дією пеніциліну та інших речовин стафілококи можуть утворювати L-форми. Стафілококи добре забарвлюються аніліновими фарбами, грампозитивні. Є факультативними анаеробами.

1.2 Культуральні характеристики

Стафілококи - аероби та факультативні анаероби. Добре розвиваються на звичайних живильних середовищах при температурі від 10 до 43°С (оптимум 30-37°С) при рН - 7,2-7,6. Зростання можливе і в слабокислому середовищі. Стафілококи викликають дифузне помутніння МПБ із подальшим випаданням невеликого осаду. Через 2-3 діб на поверхні бульйону утворюються плівка і кільце пристінків. На МПА стафілококи ростуть у вигляді опуклих, з рівними краями колоній діаметром від 1 до 4 мм.

При 20-25°С, доступі кисню та розсіяному світлі стафілококи виробляють золотистий, білий, лимонно-жовтий, помаранчевий та інші пігменти, що є ліпохромами, каталазопозитивні, оксидазонегативні. Зростають середах з 5-10% NаС1.

Як виборчі середовища запропоновані: жовтково-сольовий агар, молочно-сольовий агар та ін. Найчастіше використовують середовище ЖСА (жовточно-сольовий агар), що дозволяє вже в первинних посівах виявити колонії патогенних стафілококів.

При зростанні на жовтково-сольовому агарі навколо колоній патогенних стафілококів утворюються райдужні віночки та зони помутніння. На молочно-сольовому агарі колонії стафілококів мають форму дисків з рівними краями, що утворюють різноманітні пігменти (золотистий, білий та ін.).

Ввиду сходства стафилококков по морфологии и культуральным свойствам, выросшие на питательных средах колонии отвивают на скошенный мясопептонный агар и проводят идентификацию: ставят реакцию плазмокоагуляции (патогенные стафилококки способные коагулировать цитратную кроличью плазму, как правило лизируются фагами), каталазный тест, проводят посевы на углеводные среды с манітом та ін.

Ненадійно також визначення патогенних стафілококів за їхньою здатністю давати гемоліз при зростанні на кров'яному агарі. Гемолітична здатність цих мікробів коливається в широких межах залежно від низки факторів: виду крові, що використовується, вміст у ній антигоксину, концентрації еритроцитів в агарі, товщина шару середовища та ін. Тому гемолітична ознака на практиці не забезпечує диференціацію гнійних (патогенних) стафілококів від сапрофі . Тому при санітарно-мікробіологічних дослідженнях враховують лише типові коагулазопозитивні штами гнійних стафілококів.

Реакція плазмоагуляції. У пробірку з 0,5 см3 стерильної плазми крові вносять одну бактеріальну петлю агарової алі 0,1 см3 бульйонної 18-24-годинної культури випробуваного мікроорганізму, інкубують при 37 ° С і враховують результат через 30 хв, 2,4 і 24 год. позитивному результаті утворюється щільний або пухкий потік. Якщо використовували розведену плазму, то потік плаває в рідині.

1.3 Біохімічні властивості

Стафілококи мають сахаролітичні та протеолітичні властивості. Сахаралітичні ферменти розщеплюють лактозу, глюкозу, маніт, сахарозу, мальтозу, гліцерин до кислоти. Протеолітичні властивості стафілококу виражаються у розрідженні желатину, казеїну та інших білкових субстанцій.

1.4 Токсиноутворення та антигенна структура

Патогенні властивості стафілококів обумовлені здатністю виробляти екзотоксин та ферменти агресії. В даний час виділяють чотири типи стафілококових токсинів: альфа (а), бета (b), дельта (d), гама (у). Вони є самостійними субстанціями і викликають лізис еритроцитів, надають летальну та некротичну дію. Ці властивості неоднаково виражені в різних типів токсинів. Найбільш вивчені гемолітичні властивості токсинів, тому часто називають гемолизинами. Гемолітичну здатність стафілококів можна визначити при сівбі на кров'яний агар, на якому через 18-24 год навколо колонії стафілокока видно зону гемолізу. Некротичну дію можна встановити, вводячи культуру стафілокока внутрішньошкірному кролику. Через 24-48 год на місці ін'єкції настає некроз шкіри (позитивна дермо-некротична проба). Летальні властивості визначають внутрішньовенним введенням 0,2-0,4 мл стафілококового токсину кролику. Смерть тварини настає через 5-10 хв.

Альфа – токсин найбільш вивчений. Належить до істинних токсинів. Руйнує еритроцити кролика і барана, слабко - еритроцити людини. Термолабілен. Чинить летальну та некротичну дію. Має антигенні та імуногенні властивості, легко переводиться в анатоксин.

Дельта-токсин переважно продукується штамами стафілококів, що виділяються з патологічного матеріалу від хворих. Діє на еритроцити людини та коня. Спричиняє загибель кроликів при внутрішньовенному введенні 125 мкг очищеного токсину. Антигенні властивості виражені слабо, не перетворюється на анатоксин.

Гамма-токсин маловивчений. Викликає лізис еритроцитів кролика, барана та людини. Термолабілен.

Встановлено, що патогенні стафілококи виділяють речовини, що згубно діють на лейкоцити людини та різних видів тварин. Ці речовини дістали назву лейкоцидинів. У стафілококів описано чотири типи лейкощщин. Вони мають антигенні властивості. При імунізації тварин можна отримати імунну сироватку, що має здатність нейтралізувати лейкоцитолітичну дію отрути.

Патогенні стафілококи здатні продукувати ентеротоксин, який викликає харчові отруєння. Стафілококові харчові інтоксикації виникають після їди, що містить ентеротоксин, виділений стафілококами при розмноженні в продукті. Важливою особливістю стафілококового ентеротоксину є термостійкість. Тому продукти, що містять ентеротоксин, навіть після термічної обробкиможуть стати причиною харчового отруєння.

В останні роки у деяких патогенних стафілококів знайдено особливий екзотоксин, який був названий Стафілококи, що виділяють цей вид токсину, викликають ексфоліативні ураження шкіри (бульбашка новонароджених, локальне бульозне імпетиго, скарлатинозоподібний висип).

До токсичних субстанцій відносяться ферменти агресії, що виділяються стафілококами:

1) плазмокоагулаза, що викликає згортання плазми;

2) гіалуронідаза, що розщеплює гіалуронову кислоту, яка входить до складу основної речовини сполучної тканини;

3) фібринолізин, що розчиняє фібрин;

4) фосфатаза. Крім того, встановлено, що патогенні властивості стафілококів пов'язані зі здатністю їх продукувати дезоксирибонуклеазу (ДНК-азу), лецитовітелазу, ліпазу, лізоцим. Стафілококи можуть продукувати антибіотичні речовини – бактеріоцини (стафілоцини). Встановлено, що стафілоцини не тільки пригнічують зростання інших штамів стафілококів, але й інгібіторно впливають на дифтерійні палички, а також різні видибацил та клостридій.

Антигенна структура – ​​вивчена недостатньо. Виділено близько 30 полісахаридних типоспецифічних антигенів та один загальний білковий антиген. До цих антигенів отримані аглютинуючі і преципітуючі сироватки. Однак досить велика кількість культур стафілококів не піддається серологічного типування.

1.5 Стійкість у зовнішньому середовищі

Стафілокок міститься в нирці, повітрі, воді та на предметах побуту.

Серед патогенних мікробів стафілококи найбільш стійкі у зовнішньому середовищі. Вони добре переносять заморожування, зберігаючи при цьому життєздатність протягом декількох років, і висихання, будучи надалі джерелом пилової (повітряної) інфекції. Пряме сонячне світло вбиває стафілококи протягом кількох годин. При нагріванні до 70 ° С вони гинуть протягом 1 год, до 80 ° С - через 10-20 хв. Менш стійкі стафілококи до дії різних хімічних речовин: 0,1% розчин сулеми і 3% розчин карболової кислоти вбивають їх протягом 15-30 хв, 1% розчину хлораміну - через 2-5 хв. Стафілококи стійкі до підвищеної концентрації натрію хлориду. Тому при виділенні їх із забрудненого матеріалу використовують живильні середовища з підвищеним вмістом NaCl (7-10%). Стафілококи швидко набувають стійкості до антибіотиків. Особливо поширені штами, стійкі до пеніциліну, так як стафілококи мають фермент пеніциліназою. Стафілококи чутливі до діамантового зеленого.

1.6 Патогенез та клініка

Як уже зазначено, стафілококи широко поширені у зовнішньому середовищі. Вони є сапрофітами шкіри та слизових оболонок людини. У здорових людей поряд з непатогенними досить часто зустрічаються патогенні стафілококи. Переважна їх локалізація - слизова оболонка носа та зіва. Встановлено, що тільки у невеликої частини людей в організмі постійно відсутній патогенний стафілокок.

У більшості він є періодично, а деякі особи є постійними бактеріоносіями. Є категорія «злісних» носіїв, у носоглотці яких постійно й у великій кількості мешкають патогенні стафілококи, стійкі до антибіотиків, певних фаготипів і звані «епідемічними», оскільки часто є причиною стафілококових масових захворювань у лікарнях. Такі носії, особливо серед медичного персоналу, а також особи, які страждають на стафілококові захворювання, є основним джерелом стафілококової інфекції в лікарнях.

Стафілококи відіграють величезну роль у патології. Вони викликають найрізноманітніші гнійні захворювання: гнійничкові ураження шкіри та підшкірної клітковини, ангіни, отити, пневмонії, уретрити, холецистити, ентероколіти, сепсис та ін. Особливо велика їхня роль в акушерсько-гінекологічній практиці та хірургії. Стафілококи є найчастішою причиною гнійно-запальних захворювань у новонароджених аж до генералізованої інфекції - сепсису, маститів у породіль, гнійних ускладнень після операцій у хірургічних хворих. Патологічний процес викликається, як правило, патогенними стафілококами. Однак у осіб зі зниженою опірністю інфекційний процес може бути обумовлений непатогенним стафілококом. Стафілококові захворювання протікають важко, з високою летальністю, особливо у дітей раннього віку та ослаблених хворих.

Інфекція передається головним чином контактним шляхом або через повітря. При деяких захворюваннях (гнійничкові хвороби шкіри, ангіни та ін.) інфекція може бути ендогенною.

Серед стафілококових захворювань особливе місце займають харчові інтоксикації, що виникають в результаті вживання в їжу продуктів (найчастіше молочних, м'ясних та солодких страв), у яких відбулося розмноження стафілококу та накопичення ентеротоксину.

Вони мають найбільшу питому вагу серед харчових отруєнь мікробної природи. Стафілококові харчові отруєння називають токсикозами, оскільки характерна клінічна картина (багаторазове блювання, головний біль, серцева слабкість, іноді пронос) обумовлена ​​дією не стафілококу, а його ентеротоксину.

1.7 Класифікація

· Стафілокок золотистий (Staphylococcus aureus), як найбільш патогенний для людини. Названий за здатністю утворювати золотистий пігмент. Може викликати у людини гнійні запальні процеси майже в усіх органах та тканинах.

· Стафілокок епідермальний (Staphylococcus epidermidis) - часто зустрічається на шкірі та слизових оболонках людини, може викликати сепсис, ендокардит, кон'юнктивіт, гнійну інфекцію ран та гнійні інфекції сечовивідних шляхів.

· Стафілокок сапрофітний (Staphylococcus saprophyticus) - може викликати гострий циститта уретрит.

· Стафілокок гемолітичний (Staphylococcus haemolyticus)

1.8 Гемолітичний стафілокок

Гемолітичний стафілокок (Staphylococcus haemolyticus) за статистикою, у п'ятдесяти відсотках випадків провокує тонзиліт та ангіну. Це з тим, що у першу чергу уражаються слизові в дихальних шляхах. Роздратування сприяє прискоренню запального процесу. На думку фахівців, позбутися цього мікроорганізму цілком практично неможливо. Лікування стафілокока гемолітичного спрямоване на полегшення симптомів. У результаті терапії відбувається придушення діяльності патологічних бактерій. Слід зазначити, що в медичній практиці гемолітичний стафілокок менш поширений, ніж золотий. Саме останній є основною причиною виникнення різноманітних гнійних процесів. До патологій, зокрема, належать пневмонії, мастити, отити. Часто стафілокок викликає харчові отруєння. Зовні зараження може супроводжуватися висипом.

Клінічна картина захворювання. Стафілокок у носоглотці або мигдаликах, як правило, знаходиться в спокійному «сплячому» стані. Але низка факторів (переохолодження, наприклад) можуть активізувати його, спровокувати розмноження. Інкубаційний період зазвичай триває близько сорока восьмої години.

За цей час мікроорганізми активно розселяються в гортані, поширюються дихальною системою. Після цього починають проявлятись клінічні симптоми патології. Зокрема, пацієнт відчуває біль у горлі, який стає інтенсивнішим при чханні, ковтанні, кашлі, під час розмови. Також збільшуються мигдалики, можливо підвищення температури. Пацієнт може відчувати слабкість, нездужання. У районі горла спостерігається почервоніння шкіри. Крім того, можливий розвиток ускладнень: виникнення отиту, скарлатини, запалення вузлів шиї.

Терапія Полегшення симптомів здійснюється за допомогою антибактеріальних препаратів. Слід, однак, помітити, що мікроорганізми мають здатність швидко звикати до медикаментів. У зв'язку з цим при діагностиці штам бактерії має бути чітко визначено. Крім того, під час тривалої терапії доцільно змінювати препарати періодично. Часто гемолітичний стафілокок активізується у період вагітності. І тут медикаменти призначаються залежно від терміну. Лікарі призначають щадні антибіотичні засоби. Крім того, рекомендовані препарати для місцевого застосування, що полегшують симптоми. До таких засобів відносять різні краплі в ніс, полоскання, зрошення для горла. Після проведення терапевтичного курсу лікар призначає дослідження: посів на бактерію. Якщо навіть мікроорганізм знайдено, це не означає, що має місце серйозне захворювання. У разі фахівці рекомендують зміцнювати здоров'я, підвищуючи імунітет. Під час вагітності слід включати до раціону більше овочів та фруктів (свіжих), уникати нервових, стресових ситуацій, емоційних станів. Не слід забувати про те, що кожна людина зазнає атаки мільйонів патологічних бактерій. Слід сказати, що гемолітичний стафілокок не завжди передбачає прийом антибіотиків. Залежно від стадії патології лікар підбере потрібну терапію.

Сапрофітний стафілокок (Staphylococcus saprophyticus) вважається наймирнішим, і рідко вражає дітей. Основне його місце проживання - це стінка сечового міхура і шкіра поблизу геніталій, тому неважко здогадатися, що він є збудником циститу, якому більше схильні жінки.

І хоча за статистикою, цей мікроорганізм виявляється у 5% обстежених, далеко не у всіх він викликає будь-які захворювання. Якщо в людини міцний імунітет, він є лише носієм стафілокока. Якщо ж захисні функції організму ослаблені, то бактерія починає активно розмножуватися, що проявляється стандартними симптомами циститу:

· Порушення сечовипускання (нетримання сечі та часті позиви);

· Болючість сечовипускання;

· пекучі болі в промежині та свербіж;

можливі загальні інтоксикаційні симптоми, такі, як запаморочення, слабкість, нудота та ін, але вони турбують не так часто.

У поодиноких випадках сапрофітний стафілокок може викликати запалення в нирках, і поряд з циститом потрібно лікувати пієлонефрит.

2. Лікування стафілокока

Лікування стафілокока сапрофітікусу зводиться до вживання показаних антибіотиків, не кажучи про само собою зрозуміле симптоматичне лікування, що передбачає спринцювання, теплі ванни та вживання фітопрепаратів. Однак до курсу антибіотиків потрібно поставитися максимально серйозно, і пропити його до кінця, навіть, якщо хворобливі симптоми вже перестали турбувати. , вбивається більшість стафілокока, і мікроорганізми, що залишилися, вже не можуть розмножуватися і «атакувати» з тією ж силою, через що пацієнт відчуває полегшення. Однак якщо кинути прийом антибіотиків, то можливий швидкий рецидив захворювання, який вилікуватиме набагато складніше.

Річ у тім, що стафілококи стають резистентними, тобто. стійкими до цього медикаменту, і необхідно вже застосування сильніших засобів із можливими системними побічними ефектами. Крім того, кожна наступна мутація стафілокока лише збільшує його здатність до виживання у найважчих умовах.

Лікування сапрофітного стафілококу при вагітності.

Особливо яскраво даний вид бактерії проявляється під час вагітності, оскільки цьому сприяють ослаблений імунітет, змінений гормональний фон і схильність до різних стресів. В принципі, проявившись у вигляді слабкого циститу, часом можна обійтися і симптоматичним лікуванням. Проте якщо жінка перебуває у групі ризику, тобто. хворіла на важкий цистит або навіть пієлонефрит до вагітності, необхідно починати повне лікування щадними антибіотиками.

На третьому триместрі вони не настільки небезпечні для малюка через сформовану плаценту, здатну відторгати патологічні впливи. А ось шкідливе поширення стафілокока може виявитися значно небезпечнішим, тому при появі перших симптомів циститу потрібно пройти обстеження у кваліфікованого фахівця.

Епідермальний стафілокок.

Епідермальний стафілокок (Staphylococcus epidermidis) на відміну від «золотистого стафілокока» є представником нормальної мікрофлоришкіри людини, тому шкоди здоровій людині вона практично не здатна принести. Розвивається в основному у ослаблених виснажених людей, при дисбактеріозі, вагітних жінках, і тих, які нещодавно перенесли операції або перебувають у відділеннях реанімації. Мікроб проникає в організм через рани, судинні та сечові катетери, дренажі. У зв'язку з цим може виникнути зараження крові чи запалення внутрішньої оболонки серця (ендокардит). Тому епідермальний стафілокок є головним покаранням для багатьох хірургів, які займаються внутрішнім протезуванням. Оскільки судини і штучні клапани інфікуються, саме цим мікробом.

Інфікування при імплантації тривалий час зазвичай відбувається у прихованому характері. У хворих із нейропенією відбувається розвиток масивної бактеріємії з тяжкою інтоксикацією, яка може призвести до смерті. Інфікування судинних імплантатів призводить до розвитку хибних аневризм, що згодом може також загрожувати життю пацієнта.

У жінок при інфікуванні епідермінальним стафілококом уражаються сечівники, викликаючи при цьому запалення поверхневих тканин. Спочатку з'являються неприємні болі в ділянці живота, температура тіла сягає 40 градусів, самопочуття погіршується, можуть з'явитися різні висипання на шкірі у вигляді прищів. При ускладненні потрібна термінова госпіталізація. Але перш за все лікар повинен провести повну діагностику захворювання, далі враховуючи силу впливу стафілокока, призначає курс - допоміжних медикаментів (ферменти, вітаміни та інші).

Лікування епідермального стафілокока.

Найкращий спосіб для запобігання хворобі - це дотримання особистої гігієни. Лікування стафілококових хвороб - досить складне завдання, тому що немає такого мікроба, щоб міг зрівнятися за здатністю до вироблення стійкості до антибактеріальних засобів та антибіотиків. Застосування пеніциліну довело цей факт. З цього випливає, що застосування антибіотиків зовсім необов'язково, про що говорить випадок пов'язаний з харчовим отруєнням. Дана стафілококова хвороба антибіотиків не потребує, тому що тут більшою мірою грає роль не мікроб, а його токсини.

В даний час нові бактеріологічні методи дозволяють не тільки виявити епідермальний стафілокок, але й визначити чутливість до ліків. З таких методів лікар призначає відповідну терапію.

Сумно те, що перенесена інфекція не залишає тривалого імунітету. Незабаром при ослабленій імунній системі людина знову може захворіти. До токсинів одного стафілокока з'являються антитіла, яких організм ще не в змозі визначити.

Золотистий стафілокок.

Найчастіше золотистий стафілокок (Staphylococcus aureus) утворюється в носових проходах, пахвовій області. Хронічними переносниками є працівники медичних закладів, хворі на атопічний дерматит, наркомани.

У здорових людей основною пристанню стафілокока є порожнина носа. Хоча може бути й таке, що вони мешкають у гортані, промежинках, пахвовій ділянці, шлунково-кишковому тракті та волосяній частині голови.

20% дітей до 2-х років життя можуть бути носіями золотистих стафілококів. Інфекція поселяється в носовій порожнині. Вже у віці від 4 до 6 років це проявляється у 30-50% дітей. У дорослих відсоток носіїв коливається від 12% до 50%.

Пройшовши госпіталізацію, відсоток пацієнтів коливається в межах 20-30ти. Це більше стосується тих пацієнтів, які приймали антибіотики, хворіють на діабет або будь-які інфекційні захворювання або перебувають на гемодіалізі. У стаціонарах штами золотистих стафілококів беруть відповідальність за гнійні запалення та ранові інфекції. Причиною ранових інфекцій можуть бути стафілококи у носових проходах.

Серед працівників лікарень та поліклінік відсоток працівників, які є переносниками золотистого стафілококу, сягає 35%.

Після першої менструації у жінок, у 5-15 відсотках випадків, може з'явитися стафілокок. Під час менструацій цей відсоток збільшується і може сягати 30% жінок.

Деякі штами виробили стійкість до антибіотиків, таких як цефалоспорини та пеніциліни (оксацилін, нафцилін, диклоксацилін, метицилін). Їх ще називають метицилін-резистентні золотисті стафілококи. І щороку кількість таких штамів зростає. Підхопити заразу можна у будь-якому громадському місці. Смертність від цього становить 30 %.

Виявлення стафілокока.

Виявити кількість золотистого стафілокока можна за допомогою аналізу калу на дисбактеріоз. Перевірку проходять під час підозр, у пологових будинках, при періодичному обстеженні медичного персоналу. Оскільки золотистий стафілокок – єдиний коагулаза-позитивний патогенний стафілокок, то перевірка проводиться тестом на коагулазу.

Ступені золотистого стафілокока.

У медицині вважається нормою, якщо виявився стафілокок 4-го ступеня за результатами аналізів, такий результат вимагає мінімального лікування.

До нього входять профілактичні дії, підтримання імунітету, позбавлення авітамінозу.

Виявлені стафілококи 10 в 4 ступені не є дуже небезпечними, проте лікування потрібне, тим більше, що вилікувати золотистий стафілокок вилікувати найбільш важко, на відміну від інших. По-перше, слід не допустити звикання до антибіотика, який призначить виключно лікар, по-друге, у тонусі потрібно тримати імунну систему, що спричинить відновлення мікрофлори в організмі. Курс лікування повинен бути пройдений до кінця, інакше золотисті стафілококи, що залишилися, виживуть і стануть невразливими для даного лікування.

Симптоми золотистого стафілокока.

Золотистий стафілокок викликає гнійні та запальні процеси не тільки на шкірі, але і на різних органах, проявляється у вигляді прищів, фурункулів, карбункулів, висипу, гнійного маститу на грудях матері-годувальниці. Якщо інфекція потрапляє на слизову оболонку носоглотки, то можливо це буде причиною розвитку ангіни, синуситу, отиту та інших захворювань дихальних верхніх шляхів. Якщо інфекція потрапить у легені новонародженого, це може викликати сильну пневмонію, при ураженні кісток викликає остеомієліт, нирок - пієлонефрит серця - ендокардит, і цей список можна продовжувати. Найстрашніше, що може статися, це зараження крові, що призведе до сепсису. Це може бути пупковий сепсис, пухирчатка, що ще називається «синдромом ошпарених немовлят», тобто широке гнійне ураження шкіри.

Якщо стафілокок потрапляє в кишечник, то це проявляється у порушенні роботи ШКТ, відбувається отруєння. Імунітету до хвороби не формується, тому потрібно бути обережним при повторному зараженні.

Ознаки, що свідчать про поразку стафілококовою інфекцією:

· Крім фурункулів, прищів та інших різних порушеннях на шкірі, можуть бути запалення, схожі на скарлатину. Це говорить про внутрішню поразку організму, про остеомієліт, наприклад, сепсис. Потрібно бути акуратним із злоякісним сепсисом, оскільки це може призвести навіть до сепсису мозку.

· Течія проходить гостро та швидко, відбувається сильна лихоманка, можуть розвиватися задишка, гіперемія, тахікардія. Не виключена пневмонія.

· На грудях матері-годувальниці може виникнути гнійний мастит. У такому разі годівлю зупиняють.

· На 5-6 добу різко підвищується температура та кишкове отруєння.

· Якщо проявляється ангіна, викликана стафілококом, то вона виглядає як стрептококова, але пеніциліном не лікується.

· Тривалий сепсис

· Токсичний шок

Лікування золотистого стафілокока.

Завдання це дуже складне, але реальне. Потрібно набратися терпіння та не запускати. Після того, як буде здано аналіз на антибіотиків чутливість, лікар повинен призначити комплексне лікування. Лікування проводить лікар-дерматовенеролог. Застосовують зазвичай сульфаніламідні препарати та антибіотики. Так як саме золотистий стафілокок мають таку особливість, що виробляє стійкість до антибіотиків, тому лікування – завдання не просте, тим більше якщо поразка організму трапляється не вперше.

Після пройденого курсу лікування аналізи здають повторно, і якщо відбулося повне одужання, то лікування припиняється. Якщо є стафілокок 4 ступеня, то потрібно пройти профілактичні заходи, усунути авітамінози, дотримуватись правил особистої гігієни, уникати травматизму і стежити за пітливістю.

Лабораторна діагностика.

Методи дослідження:

1. Мікроскопічний

2. Бактеріологічний

Матеріал для дослідження:

1) Гній-при фурункулах, карбункулах, абсцесах;

2) Слиз із зіва - при ангінах;

3) Мокрота-при пневмоніях;

4) Сеча при циститах;

5) Дуоденальний вміст – при холециститах;

6) Кров – при підозрі на сепсис;

7) Промивні води шлунка, залишки їжі за підозри на харчові отруєння;

8) Ранне відокремлюване.

Мікроскопічний метод застосовується як фрагмент бактеріологічного.

Бактеріологічний метод дослідження.

Перший день.

Біоматеріал, взятий у пацієнта, надходить у мікробіологічну лабораторію.

Далі біоматеріал засівають на ЖСА (жовтково-сольовий агар), МСА (молочно-сольовий агар) та кров'яний агар. Ставлять термостат при 37С на 24 години. При підозрі на сепсис кров у кількості 10-15 мл засівають у флакони з цукровим бульйоном 1:10 у середу Кітт-Тароцці для виділення анаеробного стафілококу, ставлять у термостат на 24 години за температури 37С. Протягом 20 діб виробляють висіви на кров'яний агар.

Другий день.

Вивчення культуральних властивостей:

a) на ЖСА патогенні стафілококи - навколо колонії утворюється помутніння у вигляді райдужного (перламутрового) віночка, тому що лецитовітелаз стафілокока розщеплює лецитин живильного середовища;

b) на МСА – колонії за кольором жовті, лимонно-жовті чи білі.

c) на КА зони гемолізу.

Підозрілі колонії пересівають на МПА (м'ясо-пептонний агар) виділення чистої культури.

Третій день

1. Визначають чистоту виділеної культури - забарвлюють препарат за Грамом - стафілококи в мазку - Гр+ коки, розташовуються у вигляді грон винограду.

2. Визначають патогенні властивості:

а) з чистої культури ставлять реакцію плазмокоагуляції, для цього цитратну кролячу плазму розводять 1:5 фізіологічним розчином, потім наливають по 0,5 мл в 2 пробірки, в дослідну пробірку бактеріологічною петлею вносячи чисту культуру стафілокока, друга контрольна пробірка. Облік реакції проводять через 2,6 і 18 годин (патогенний стафілокок продукує фермент коагулазу і викликає згортання плазми - осад у вигляді желе, в контрольній пробірці коагуляція не відбувається);

б) посів на ЖСА - облік перламутрового віночка;

в) посів на МПА з 1% манітом - проводиться укол у стовпчик;

г) посів на КА – виявлення гемолітичних властивостей.

3. Фаготипіровування - виявлення джерела інфекції. Для цього використовують 20 типових фагів. Дно чашки Петрі поділяють на 20 однакових квадратів. У чашку Петрі заливають МПА із глюкозою. Чисту культуру стафілокока засівають суцільним газоном і кожен квадрат вносять типовий фаг. Ставлять термостат при 37С на 24 години.

4. Посів культури на МПА – визначення культуральних властивостей.

5. Посів культури стафілококу суцільним газоном визначення чутливості до антибіотиків.

Четвертий день.

Облік результатів та ідентифікація виділеної культури:

1. Реакція плазмокоагуляції – позитивна;

2. На ЖСА – перламутровий віночок навколо колонії;

3. Розщеплення маніту в анаеробних умовах (зміна кольору середовища);

4. На КА навколо колонії зона гемолізу;

5. Ліза бактерій у відповідному квадраті з фагом;

6. Дифузне помутніння на МПБ;

7. Визначення зони затримки зростання – облік чутливості до антибіотиків.

Видача відповіді: Виділено стафілокок золотистий (патогенний).

Висновок

патогенний токсин стафілококовий клінічний

Незважаючи на те, що стафілококи належать до найбільш легко виявлених і розпізнаваних мікроорганізмів, що не вимагають складних діагностичних прийомів для їх виявлення, практичної роботимікробіологи досі мають певні труднощі при встановленні їх причинної ролі в ряді різних захворювань. З одного боку, присутність патогенних стафілококів, що виявляється в досліджуваному матеріалі, не завжди є переконливим доказом їхнього етіологічного значення. З іншого, враховуючи велику різноманітність проявів біологічної активності цих мікробів, що залежить від різних факторів, що не завжди піддаються обліку, широку їх мінливість під впливом лікарських речовин і самого макроорганізму, досить складно буває визначити їх потенційну патогенність. Нарешті, третя причина пов'язана з тим, що стафілококи є представниками нормальної мікрофлори групи умовно патогенних мікроорганізмів і, поруч із непатогенними, патогенні представники мешкають в організмі людей, поширюючись у своїй дуже нерівномірно різні ділянки людського тіла.

Список використаної літератури

1) Основи мікробіології, вірусології та імунології К.С. Камишева.

2) Медична мікробіологія – Поздєєв Оскар Кімович.

3) Медична мікробіологія навчальний посібник – О.М. Корлюка.

4) Мікробіологія – Ф.К. Черкес, Л.Б. Богоявленська.

Розміщено на Allbest.ru

Подібні документи

Види та шляхи передачі стафілокока. Клінічні прояви факультативних анаеробів. Сучасні методи діагностики захворювання. Сучасний підхід до лікування стафілококових інфекцій. Зміцнення імунітету людини, дотримання санітарно-гігієнічних норм.

презентація , доданий 22.10.2014


Етіологія та патогенез досліджуваного захворювання, Загальний описзбудника та механізм його дії всередині людського організму. Клінічна класифікація та форми перебігу, передумови розвитку. Діагностика та побудова схеми лікування, прогноз.

презентація , доданий 17.02.2015


Поняття лептоспірозу – інфекційного захворювання, що викликає ураження кровоносних капілярів, печінки, нирок, м'язів. Морфологія та тинкторіальні властивості лептоспірозу, епідеміологія, патогенез та клінічна картина. Методи мікробіологічної діагностики.

презентація , доданий 03.05.2015


Лейкози – захворювання пухлинної природи. Їхня класифікація в залежності від морфологічних властивостей пухлинних клітин. Причини виникнення захворювання, його клінічна картина, стадії перебігу. Аналізи та обстеження, специфіка лікування захворювання.

презентація , доданий 31.10.2012


Поняття лептоспірозу, його збудник. Морфологія та тинкторіальні властивості, культивування та антигенна структура. Епідеміологія та патогенез хвороби, її клінічна картина та мікробіологічна діагностика. Профілактика та лікування лептоспірозу.

презентація , доданий 25.05.2015


Мікробіологічна характеристика збудника чуми. Шляхи передачі інфекції. Клінічна картина захворювання. Епідеміологічні особливості чуми. Опис трьох пандемій чуми, які пройшли протягом двох останніх тисячоліть. Чума у ​​сучасному світі.

реферат, доданий 18.09.2013


Види стафілокока: золотистий, епідермальний, сапрофітний та гемолітичний. Висока стійкість бактерії до висушування, заморожування, дії сонячного світла та хімічних речовин. Шляхи передачі збудника та основні клінічні прояви хвороби.

презентація , доданий 13.11.2014


Визначення поняття "ендометріоз". Участь у механізмі захворювання клітинних ферментів, рецепторів до гормонів, і навіть генних мутацій. Етіологія, патогенез, класифікація та клінічна картина генітального ендометріозу. Діагностика та лікування захворювання.

презентація , доданий 23.09.2014


Анатомія та фізіологія, визначення поняття "гострий апендицит", типова клінічна картина захворювання. Клінічна характеристикагострого апендициту: діагностика, симптоматика та можливі ускладнення. Особливості діагностування та перебігу хвороби.

презентація , додано 08.11.2013


Виділення збудника у початковому періоді хвороби при мікробіологічній діагностиці, дослідження крові, вивчення колоній на диференціальному середовищі. Дослідження дуоденального вмісту з діагностичною метою при обстеженні на бацилоносійство.

Staphylococcus aureus bacteria є pathogens до both man і інші mammals. Вони є грам positive bacteria, що є невеликий кінець в shape (cocci) і occur as clusters з'явиться як рядок grapes на електронні мікроскопи.

Microbiology of Staphylococcus:-

Coagulase reaction

Staphylococcus були earlier divided до двох груп на основі їхньої здатності до clot blood plasma. Coagulase-positive staphylococci constitute the most pathogenic species S aureus. Коагуляція-negative staphylococci (CNS) є зараз відомий до співпраці понад 30 інших видів. Це CNS, що є повним шкідливим bacteria на шкіру, але деякі з них може викликати раптовий вплив.

Ці дні coagulase реакція не є тривалим використанням класифікації S.aureus. This is because coagulase is a marker for S aureusале це не прямий контроль, що це віруленс фактор. Неймовірно, що терм залишається в широкому порядку, використовуючи багато клінічних мікробіологістів.

Proteins and virulence

S. aureus expresses certain proteins and polysaccharides на його поверхні. Це є коректований з virulence. Virulence є ефектом багатьох factors expressed during infection. The bacteria also produce certain toxins. У артеріях антибіотиків неперешкоджають стафілокококальні токсини і ензими.

Taxonomy and naming conventions

At least 30 species of staphylococci have been recognized by biochemical analysis. Це є особливо so з DNA-DNA hybridization. З цього, 11 є в людини як harmless bacteria on skin, в nose and throat. Вони можуть спричинити негативні і чутливі в певних випадках.

Identifications under the microscope

Ці bacteria є Gram-positive cocci про 0.5 - 1.0 μm в діаметрі. Вони є present як grape like clusters. Вони можуть також траплятися в кімнатах і останнім часом в шортах. У clusters arise because staphylococci divide в двох планах. Це clustering helps to distinguish staphylococci from streptococci, which usually grow in chains.

Growing on solid medium colonies of S. aureus є appear as golden clumps.

Catalase test

Це test helps to distinguish between streptococci (that is catalase-negative) and staphylococci (which are catalase positive). На agar slant or broth culture of bacteria several drops of 3% hydrogen peroxide are applied. Catalase-positive cultures bubble at once. Це може бути прийнято на blood agar since blood itself will produce bubbles.

Identification of S.aureus

Після того, як випадок з lesions є таке, вони можуть бути розподілені з грамів штанів. S. Aureus is Gram positive. Organism від клінічним specimen from blood culture or pus is streaked over solid media such as blood agar, tryptic soy agar or heart infusion agar. Якщо specimen issuspected to be contaminated it is plated on mannitol salt agar containing 7.5% sodium chloride.

Іншим тестом є виробництво thermostable deoxyribonuclease. S aureusможе бути сформульована згідно з testing colonies for agglutination with latex particles coated with immunoglobulin G and fibrinogen which bind protein A і clumping factor, respectively.

Microscopically cells occur singly and in pairs, short chains, and grape-like clusters. Смуга wall of bacteria contains teichoic acid. Ribitol teichoic acid (Polysaccharide A) is present in Staphylococcus aureus. Protein A uniformly coats surface of S. aureus and is usually oxidase negative.

Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus- факультативно анаеробні грампозитивні коки, нерухомі, каталазо- та коагулазопозитивні. Деякі штами S. aureusпродукують стафілококові ентеротоксини (SEs), що викликають харчові отруєння. Стафілококи присутні у повітрі, пилу, стічних водах, воді, молоці, продуктах харчування, а також на обладнанні харчових виробництв, на різних поверхнях у навколишньому середовищі, на шкірних покривах людей та тварин. Саме люди та тварини є основним резервуаром інфекції. Стафілококи присутні в порожнинах носа, горлі, а також на волоссі і шкірному покриві принаймні у 50% здорових людей. Staphylococcus aureusздатний рости в широкому діапазоні температур від 7 до 48,5 ° С (оптимум 30 - 37 ° С); рН 4,2 - 9,3 (оптимум рН 7,0-7,5) та при високій концентрації хлориду натрію (до 15% NaCl). Такі властивості дозволяють бактеріям заселяти найрізноманітніші продукти. Продукти, що найчастіше є причиною стафілококових харчових отруєнь - це м'ясо та м'ясопродукти, м'ясо птиці, яйця, салати (яйце, тунець, курка, картопля, макарони), кондитерські вироби (наприклад, пиріжки з кремом, шоколадні еклери), начинка сендвіч молоко та молочні продукти. Таким чином, продукти, які в процесі приготування значний час опрацьовуються вручну і згодом зберігаються в теплі, можуть бути реальним джерелом харчових отруєнь стафілококових.

Інтоксикація при стафілококовій інфекції

Причиною хвороби є продуковані Staphylococcus aureus токсини, тому захворювання характеризується дуже коротким періодом інкубації - зазвичай від 0,5 до 6 годин. Сприйнятливість хворого до токсинів визначається станом хворого, концентрацією токсину та кількістю з'їденого зараженого продукту. Інфекційна доза може бути менше 1,0 мкг, що відповідає приблизно 100.000 КУО/г продукту. Найбільш поширеними симптомами захворювання є нудота, блювання, відраза до їжі, спазми в животі та діарея. Період реабілітації займає, як правило, 1-3 дні, але у тяжких випадках повне відновлення може тривати більше часу. Хвороба не передається оточуючим, хворим необхідно приймати велику кількість рідини.

Патогенність, масштаби захворювання

Коагулозоположитеплні стафілококи - це грампозитивні каталазопозитивні мікроорганізми, які утворюють типові колонії на селективно-діагностичному поживному середовищі, що дають позитивну реакцію на коагулазу (S. aureus spp. anaerobius) або специфічну для кролич геном при визначення стандартним методом. Staphylococcus aureus (золотистий стафілокок) - це коагулозопозитивні стафілококи, що утворюють ацетоїнта ферментують мальтозу в аеробних умовах у процесі визначення цих біохімічних тестів стандартним методом.

Згідно з недавніми дослідженнями в розвинених країнах з усіх відомих інфекцій найчастіше до смерті наводить одна з найвідоміших, «звичайних» бактерій - Staphylococcus aureus (золотистий стафілокок; всі штами стафілококів, що продукують коагулазу, називають золотистими). Цей умовно-патогенний мікроорганізм виділяють у 15-30% здорових людей, причому носійство у більшості їх обмежено кількома місяцями. При дефіциті імунітету у хворого збудник є причиною численних небезпечних для життя зооантропонозних інфекцій. Найпоширеніша токсична стафілококова хвороба – це харчове отруєння. Багато штами золотистого стафілокока продукують ентеротоксин.Ця отрута викликає діарею, блювання, біль та спазми в животі. Згідно з проведеним у Новій Зеландії дослідженням 8,6% дітей, госпіталізованих із сепсисом, викликаним Staphylococcus aureus, вмирають. Дерматовенерологи багатьох країн стурбовані збільшенням кількості стафілококових інфекцій та смертельних випадків через стафілококи. Бактерії викликають псування харчових продуктів, включаючи і так звані продукти, що «не псуються». Розмножуючись, наприклад, у твердому сирі та салямі, бактерії виділяють токсини. Саме вони є найчастішою причиною серйозних харчових отруєнь. При кулінарній обробці стафілокок гине, але його термостабільні токсини не руйнуються. Стафілококи є причиною багатьох хвороб людини, включаючи серцеві (ендокардит і перикардит), опорно-рухового апарату (остеомієліт та інфекційний артрит). На шкірі та в м'яких тканинахстафілокок викликає так званий синдром шкіри, що лущитьсяі целюліти, що є найчастішими інфекційними хворобами шкіри За даними ВООЗ, золотистий стафілокок очолює список бактерій, якими найчастіше заражаються в медичних закладах. Високим є ризик інфікування стафілококом при використанні внутрішньовенних катетерів та інших медичних пристроїв, що контактують з внутрішнім середовищем організму. Фактором ризику є штучна вентиляція легень. Інфікування стафілококом може також відбуватися за порушення звичайних правил гігієни в лікарнях. Усього на S. аureus припадає близько 30% усіх «шпитальних інфекцій». Стафілококи, які вижили в умовах постійного застосування дезінфікуючих засобів та використання антибіотиків - найсерйозніший фактор ризику для персоналу, основа госпітальної інфекції.

Таксономія

Стафілококи - рід кулястих нерухомих аспорогенних грампозитивних хемоорганотрофних факультативно-анаеробних або аеробних бактерій із сімейства Micrococcaceae. У роду Staphylococcus виділяють близько 30 видів, при цьому 14 виявлені на шкірі та слизовій людини, включаючи S. aureus, S. epidermidis, S. saprophyticus. Для видової ідентифікації використовують в основному 3 тести: продукцію плазмокоагулази, анаеробну ферментацію маніту та глюкози. Антигенна структура бактерії складна, видоспецифічними антигенами є тейхові кислоти.

Морфологія бактерій та колоній

Бактеріальні клітини діаметром 0,5-1,5 мкм діляться у кількох площинах несиметрично, утворюючи скупчення, що нагадують грона винограду. Зустрічаються поодинокі клітини, пари та зошити. Клітинна стінка містить пептидоглікан і гліцеринтейхову кислоту. Стафілококи формують гладкі колонії, забарвлені каротиноїдами у жовтий або помаранчевий кольори. Однак пігментування не є видовою ознакою. При зростанні на жовтково-сольовому агарі утворюються каламутні круглі рівні колонії кремового, жовтого або оранжевого кольору. При культивуванні в рідких середовищах бактерії викликають їх рівномірне помутніння, а потім утворення пухкого осаду, що перетворюється на тягучу масу.

Фізіолого-біохімічна характеристика

Стафілококи - факультативні анаероби, але швидко і рясно ростуть за наявності кисню. Хемоорганотрофи з окислювальним та ферментативним метболізмом. Біохімічні дуже активні. Продукують каталазу, на середовищі з глюкозою в анаеробних умовах більшість штамів утворюють ацетоїн (позитивна реакція Фогеса-Проскауера). Виділяють аміак при зростанні на аргеніновому бульйоні, відновлюють нітрати до нітритів або молекулярного азоту, активно гідролізують білки, в аеробних умовах розщеплюють багато вуглеводів до оцтової кислоти та вуглекислого газу. Родовою ознакою є ферментація глюкози в анаеробних умовах, що відрізняє стафілококи від мікроків. Бактерії ростуть на основних середовищах при 37 ° С (оптимум 35-40 ° С), але можуть зростати і в ширшому інтервалі температур (6,5 - 46 ° С). Оптимум зростання відмічено при рН 7,0-7,5, але можливе зростання в діапазоні рН=4,2÷9,3. Добре витримують підвищений осмотичний тиск, тому елективним субстратом для них є середовища з високою концентрацією хлориду натрію - жовтково-сольовий або молочно-сольовий агар. Стафілококи добре переносять висушування, зберігаючи при цьому вірулентність; гинуть при прямій дії сонячного світла протягом 10-12 годин. Досить стійкі до нагрівання: при 70-80 про З гинуть за 20-30 хв, при 150 про З - за 10 хв; сухий жар вбиває їх за 2:00. Бактерії стійкі до дії низьких температур, повторне заморожування та розморожування їх не вбиває. Менш стійкі стафілококи до дії дезінфектантів (перекису водню та ін.), але резистентні до дії чистого етанолу. При вирощуванні в аеробних умовах бактерії потребують амінокислот і вітамінів, анаеробних - вимагають додатково урацил і додаткові джерела вуглецю. На кров'яному агарі можуть утворювати кілька видів гемолізинів- Речовин, що вражають еритроцити, лейкоцити та інші клітини. Продукують також фібринолізин, фосфатазу, бактеріоцин; окремі штами продукують коагулазу, ДНК-азу, H 2 S та ентеротоксини (до 10 видів, що характеризуються летальною, гемолітичною або некротичною дією). Ферментують деякі вуглеводи із виділенням кислоти без газу. Стійкі до лізоциму, чутливі до різних антибіотиків. Патогенні для людини види мають один із 4 факторів токсичності, таким як: 1) екзотоксин, 2) ентеротоксин, 3) лейкоцидин, 4) коагулаза (фермент патогенності). Крос-резистентність до антибіотиків контролюється R-плазмідою. Іншим прокаріотам цей фактор стійкості передається трансдукцією.

Джерела та фактори передачі інфекції

Стафілококи – умовно патогенні мікроби. Є представниками нормальної мікрофлори людини і тварин - густо колонізують різні біотопи організму (шкіру, слизову оболонку носа та зіва ротової порожнини, черевну порожнину та пахвові області). Стафілококи впроваджуються в організм через шкірні покриви та слизові оболонки повітряно-краплинним та повітряно-пиловим шляхом. Механізм інфікування зазвичай пов'язаний із перенесенням збудника з ділянок колонізації на травматизовану поверхню (наприклад, шкірні покриви). Істотну роль відіграють також тісні контакти з носіями та особами, які страждають на стафілококові ураження. Стафілокок стійкий до багатьох зовнішніх впливів, тому виявляється у зовнішньому середовищі - повітрі (пил), ґрунті, на предметах побуту. Джерела та фактори передачі стафілококової інфекції множинні. Основні джерела – хворі зі стертими формами стафілококової інфекції або носії, рідше – хворі тварини, наприклад, (при харчових стафілококових отруєннях та ентероколітах) хворі на мастит корови. Найбільшу епідеміологічну небезпеку становить медичний персонал, який може бути носієм госпітальних штамів стафілокока. Для стафілококової інфекції характерна множинність механізмів, шляхів та факторів передачі. Бактерії можуть передаватися контактночерез нестерильний медичний інструмент, руки медперсоналу, аліментарноз молочними продуктами та кондитерськими виробами, аерогенно та парентерально(При ін'єкціях).

Патогенез

Сприйнятливість до стафілококів дуже низька у осіб із нормальним імунним статусом та підвищена у імунокомпромісних господарів. Найчастіше стафілококова інфекція розвивається і натомість вторинних імунодефіцитів. Факторами патогенності збудника є мікрокапсула, компоненти клітинної стінки, ферменти агресії та токсини. Мікрокапсула захищає бактерії від фагоцитозу, сприяє адгезії мікробів та їх поширенню по тканинах. При вирощуванні in vitro вона не утворюється. Компоненти клітинної стінки стимулюють розвиток запальних реакцій та нейтралізують імуноглобуліни, знерухомлюють фагоцити. Тейхові кислоти запускають каскад компліменту(компонента імунологічних реакцій) альтернативним шляхом. Фермент агресії стафілококів коагулазу існує у трьох антигенних формах та викликає згортання сироватки крові. При низці патологічних станів організму стафілококи залишають свої звичайні біотопи, долають тканинні бар'єри і привносяться кровотоком у внутрішнє стерильне середовище організму. Там вони викликають типову патологічну реакцію – запалення. Воно проявляється у формі гнійно-запальних процесів різної локалізації та ступеня тяжкості, аж до сепсису та септикопіємії. Стафілококи є етіологічним факторомзахворювань, переважна більшість яких мають гнійно-запальний характер. Бактерії здатні вражати практично будь-які тканини організму. Викликані S. aureus інфекції різноманітні і включають понад 100 нозологічних форм, серед яких хвороби: 1) шкіри та підшкірної клітковини(абцеси, панариції, фурункульоз та ін.), 2) органів дихання(ангіна, плеврит, пневмонія та ін.), 3) нервової системиі органів чуття(менінгіт, отит, коньюктивіт та ін.), 4) органів травлення(стоматит, перетоніт, ентерит, ентероколіт, харчова інтоксикація та ін.), 5) кістково-м'язової системи і сполучної тканини(артрити, остеомієліт), 6) кровообігу(ендокардит, флебіт та ін.), 7) сечостатевих органів(цистит, мастит та ін.), 8) стафілококовий сепсис. Ці захворювання можуть протікати гостро чи хронічно. Харчові отруєння клінічно виявляються у формі блювоти та водянистої діареї вже через 2-6 годин після вживання в їжу інфікованих продуктів - кондитерських виробів з кремом, консервів, м'ясних та овочевих салатів тощо.

Методи виявлення

На селективних диференціальних середовищах виростають, як правило, лише колонії стафілококів. Припустити стафілококову етіологію захворювання дозволяє виділення стафілокока у чистій культурі. Біоматеріал для дослідження вибирається залежно від клінічної картинихвороби. У штамів S. aureus, виділених при харчовій стафілококовій інтоксикації, визначають наявність ентеротоксинів у біологічних та імунологічних тестах. Традиційними методами попередні результати щодо ідентифікації стафілококової інфекції можна отримати через 1-2 доби.

Класичний метод

Метод виявлення S. aureus заснований на висіві навішування продукту та/або розведень його навішування в рідке селективне середовище, інкубуванні посівів, пересіванні культуральної рідини на поверхню агаризованого селективно-діагностичного середовища, підтвердження за біохімічними ознаками належності виділених типових та/або виділених типових і/або. aureus.

Сторінка 38 з 91

ПРИВАТНА МЕДИЧНА МІКРОБІОЛОГІЯ
Патогенні коки
До патогенних коків, що викликає різноманітні за своїми клінічним проявамзахворювання у людини, відносяться: 1) стафілококи, 2) стрептококи, 3) пневмококи, 4) менінгококи та 5) гонококи.
За тинкторіальною ознакою (фарбування) їх можна розділити на дві підгрупи: грампозитивні коки (стафілококи, стрептококи та пневмококи), грамнегативні коки (менінгококи та гонококи).
Характерною особливістю всіх патогенних коків є здатність викликати гнійні запальні процеси, чому їх називають також піогенними (гнійними) коками.
Найбільш різко і постійно гнійні властивості виражені у стафілококів.
Стафілококи
Морфологія та тинкторіальні властивості. Стафілококи-Staphylococcus (вперше виділені Пастером в 1880 р.) мають форму правильних куль із середнім діаметром 0,8-0,9 мк. У мазку з чистої культури стафілококи розташовуються у вигляді купок і скупчень, нагадуючи гроно винограду (рис. 60). У гною та іншому патологічному матеріалі нерідко можна зустріти одиничних коків, парних і навіть короткі ланцюжки. Вони добре фарбуються основними аніліновими фарбами, грампозитивні, суперечки, капсул не утворюють, нерухомі.
Культуральні та біохімічні властивості. Стафілококи добре ростуть на звичайних живильних середовищах як у присутності, так і без вільного кисню. Температурний оптимум 37 °.

Мал. 60. Стафілокок (а) та стрептокок (б) у чистій культурі.

Мал. 61. Колонії стафілокока на м'ясопептонному агарі. Ув. 20.

Мал. 62. Посів уколом у желатину.

Окремі колонії на поверхні агару являють собою округлі диски середньої величини, опуклі, вологі, непрозорі, гомогенної чи дрібнозернистої структури (див. рис. 01). Колір колоній залежить від пігменту, який виробляють стафілококи і може бути золотистим (Staphylococcus aureus), лимонно-жовтим (Staphylococcus citreus) та білим (Staphylococcus albus). При сівбі штрихом на скошений агар утворюється ріст стафілокока, пігментований.
Пігменти стафілокока відносяться до ліпохрому, нерозчинні у воді і забарвлюють тільки культуру, але не живильне середовище. Утворення пігменту йде інтенсивно, коли мікроорганізми вирощуються в присутності кисню при кімнатній температурі на світлі.
При сівбі уколом у желатину на 2-3-й день зростання на поверхні середовища помітна зона розрідження. У міру розрідження культура падає на дно у вигляді бавовняного осаду (рис. 62).
На бульйоні стафілококи дають рясне зростання. Через 24 години перебування в термостаті бульйон каламутніє, і на дні пробірки утворюється осад.
Стафілококи швидко створюють молоко, повідомляючи йому кислу реакцію.
Ферментують (без газу) лактозу, глюкозу, мальтозу, маніт. Здатність розщеплювати маніт зазвичай характеризує патогенні штами стафілокока.
Патогенні стафілококи на чашках із кров'яним агаром утворюють колонії, оточені зоною гемолізу, та згортають плазму цитратної крові.
резистентність. Стафілокок належить до дуже стійких мікробів. Температура 80 ° вбиває його у вологому стані протягом 10 хвилин. Температуру 70° стафілококи витримують до 1 години. Карболова кислота (3-5% розчин) вбиває їх протягом 15-30 хвилин. У гною стафілокок зберігається тривалий час.
Токсини, ферменти стафілококів, патогенність їх для тварин. Патогенні стафілококи продукують ряд токсинів та ферментів. Стафілококовий гемоліхін розчиняє еритроцити. Цей токсин термолабілен (руйнується при 55°), відноситься до екзотоксинів і при імунізації тварин можна отримати антитоксин. Фільтрат культур стафілокока має також некротичну та летальну дію. В даний час доведено, що гемолізин, некротоксин та летальний токсин є складовими частинами єдиного стафілококового екзотоксин. Ці токсини невіддільні один від одного, і виявлення одного з них є доказом патогенності виділеного стафілококу. Деякі з гемолітичних штамів золотистого стафілококу виробляють ентеротоксин, що викликає явища гострого гастроентериту. У фільтратах культур стафілококу часто виявляється лейкоцидин - отрута, що руйнує лейкоцити. З ферментів патогенні стафілококи виділяють: 1) плазмокоагул а з у - згортаючу плазму; ет зону помутніння навколо колоній на жовтково-сольовому агарі (середовище Чистовича).
З лабораторних тварин найбільш чутливі до стафілококу кролики та меншою мірою морські свинкита миші. У кроликів при внутрішньошкірному введенні культури з'являється різко виражений некроз, при підшкірному – розвиваються абсцеси, а зараження високовірулентними штамами стафілококу призводить до сепсису та загибелі тварин. До стафілококового ентеротоксину найбільш чутливі кошенята-сусунки та молоді миші.
Класифікація стафілококів. Стара класифікація стафілококів по пігменту, що виділяється ними (золотистий, білий і лимонно-жовтий) не дає можливості правильно визначити їх патогенність. Тому в даний час вважають найбільш вірною класифікацію стафілококів, запропоновану Гросом. Відповідно до цієї класифікації, всі стафілококи поділяються на три групи: патогенні, слабопатогенні та непатогенні.
Перша група – патогенні стафілококи:
а) на чашках із 5% кров'яним агаром утворюють чітку зону гемолізу;
б) при внутрішньошкірному введенні кролику викликають явища різко вираженого некрозу, що іноді закінчується смертю тварини;
в) продукують фермент плазмокоагулазу, що викликає згортання плазми протягом 2 годин;
г) виділяються головним чином від хворих на сепсис або гостру гнійну інфекцію.
Друга група – слабопатогенні стафілококи:
а) на чашках з кров'яним агаром утворюють зону слабкого неповного гемолізу;
б) при внутрішньошкірному введенні кролику викликають у місці введення почервоніння шкіри, іноді інфільтрат, частіше без явищ некрозу;
в) при сівбі в цитратну плазму викликають згортання протягом 6 годин і пізніше;
г) виділяються з поверхні шкіри при фолікуліті, зі слизових оболонок при катарі верхніх дихальних шляхів, З поверхні ран, але не з глибини їх.
Третя група – непатогенні стафілококи:
а) на чашках із кров'яним агаром гемоліз не виявляється;
б) при внутрішньошкірному введенні кролику явища некрозу та інфільтрату не спостерігаються, в окремих випадках з'являється почервоніння шкіри;
в) реакція плазмоагуляції негативна;
г) виявляються постійно на здоровій шкірі, на слизових оболонках зіва, носа та в повітрі.
Патогенез та захворювання у людини. Стафілококи є дуже поширеними мікробами. Їх знаходять у повітрі, воді та ґрунті, у людини – майже постійно на шкірі та слизових оболонках. Цим пояснюється той факт, що стафілокок є найчастішим збудником усіляких нагноєнь. Ушкодження шкіри та слизових оболонок або зниження їх резистентності відкриває «ворота» для стафілококової інфекції.
Найчастіше уражається шкіра. Стафілококи є збудниками фурункулів – гнійного запалення волосяних мішечків. Якщо фурункули набувають множинного характеру, захворювання називається фурункульозом. Коли кілька фурункулів зливаються разом, утворюючи більший гнійний інфільтрат, виникає карбункул.
Стафілококи зустрічаються при абсцесах (гнійниках), в ранах, що гнояться, при катарах слизових оболонок, септицемії і септикопіємії (сепсис з утворенням гнійних вогнищ у внутрішніх органах). Ентеротоксичні штами золотистого стафілокока можуть викликати харчові отруєння. Останні спостерігаються в результаті вживання зараженого стафілококом молока та інших молочних продуктів, тістечок з кремом і т. д., так як у цих продуктах стафілокок знаходить оптимальні умови для свого розмноження. У молоко патогенні стафілококи можуть потрапити або від корів, хворих на мастит, або з рук доярок, які страждають на піодермію.
Імунітет. Уродженого імунітету до стафілококу у людей немає. Однак людина має значну стійкість до цього мікроорганізму, що пояснюється захисною роллюшкіри та наявністю в крові антитіл.
Очевидно, може мати місце набутий імунітет, про що свідчить підвищення титру антитіл у хворих та перехворіли. Однак цей імунітет нестійкий. Більше того, зазначено, що у багатьох людей, які перенесли фурункульоз, виникає підвищена сприйнятливість до стафілококу.
Опірність до стафілококу може послаблюватися внаслідок різних причин- діабету, травми, виснажливих захворювань тощо.
Мікробіологічна діагностика Дослідження гною. Найчастіше матеріалом для мікробіологічного дослідження є гній. Для цієї мети при відкритих ураженнях після попереднього очищення ранової поверхні стерильним ватним тампоном дістають відокремлюване з глибших частин рани. При закритих процесах (фурункул, абсцес) з цією метою після дезінфекції шкіри проводиться пункція вогнища нагноєння стерильним шприцом. З отриманого гною роблять мазки, забарвлюють синю і Грама і мікроскопують.
За розташуванням коків і тинкторіальних властивостей важко диференціювати стафілококи і стрептококи, тому переходять до бактеріологічного дослідження, тобто до посіву гною на чашки з простим, кров'яним агаром, на жовтково-сольовий агар (див. розділ «Санітарна мікробіологія5»). і середовище збагачення (цукровий бульйон). Засіяні чашки, перевернувши вгору дном, і бульйон ставлять термостат при 37° на 1-2 діб.
На чашках із кров'яним агаром колонії утворюють зони гемолізу, діаметр яких часто у кілька разів перевищує діаметр колонії. Ці безбарвні прозорі зони гемолізу утворилися внаслідок розчинення еритроцитів, викликаного гемотоксином стафілокока. На чашках із жовтково-сольовим агаром патогенні стафілококи виростають з утворенням золотистого пігменту та зоною помутніння – у вигляді райдужного віночка навколо колонії. З однієї з колоній готують препарат, фарбують за Грамом та мікроскопують. Виявлення в препараті грампозитивних коків, розташованих у вигляді грон винограду, дає право видати позитивний орієнтовний результат. Потім залишок колонії пересівають на скошений агар отримання чистої культури. Необхідно диференціювати патогенний стафілокок від непатогенного, тобто вивчити зростання на кров'яному агарі, жовтково-сольовому агарі, посіяти в нітратну плазму та визначити токсигенність на тваринах.
Проба на плазмоагуляцію. Для реакції плазмокоагуляції Г. В. Вигідників рекомендує таку методику. У кролика беруть 10 мл крові із серця, поміщають у пробірку з 1 мл 5% розчину лимоннокислого натрію. Кров центрифугують та відсмоктують плазму. Отриману плазму перед досвідом розводять фізіологічним розчином 1:4 та розливають у стерильні пробірки по 0,5 мл. Колонії стафілококів засівають петлею в пробірки з нітратною кролячою плазмою, ставлять у термостат при 37 ° і перевіряють згортання плазми кожні 2-3 години. Патогенні стафілококи коагулюють плазму протягом 2-10 годин найчастіше протягом 4 годин.
Проба на токсігенність. Токсигенність стафілококових культур визначається досвідом на кроликах, а ентеротоксин – на кошенятах-сосунках. З туру стафілокока на скошеному агарі готують завись мікробів у фізіологічному розчиніі встановлюють за оптичним стандартом з розрахунком 2 млрд мікробних тіл в 1 мл суспензії. На боці або спині у кролика вищипують шерсть і вводять внутрішньошкірно тварині по 0,2 мл мікробної суспензії. При позитивної реакціїдома ін'єкції утворюється інфільтрат, та був і некроз.
Для виявлення летального токсину кролику вводять внутрішньовенно фільтрат бульйонної культури стафілокока з розрахунку 0,75 мл на 1 кг ваги. Смерть тварини настає за 15 хвилин.
Для визначення ентеротоксину кошенят 1,5-2-місячного віку (вагою 400 г) вигодовують вихідним зараженим продуктом або молочною культурою стафілококу. Ознаки отруєння (пронос, іноді блювання) настають через 30-60 хвилин. Спостереження ведуть 4-6 годин, і якщо за цей час у кошенят не буде жодної реакції, біологічна проба вважається негативною.
Дослідження крові. При підозрі на сепсис у хворого з ліктьової вени стерильно за допомогою шприца беруть 10 мл крові та засівають у 100-200 мл цукрового бульйону. Посів ставлять для збагачення на 24-48 годин термостат. У позитивному випадку середовище каламутніє, а в мазках з неї виявляються грампозитивні коки, що мають характерну форму та розташування. З бульйону роблять пересівання у чашку з кров'яним агаром і подальше дослідження ведуть так, як описано вище. Бульйон витримують у термостаті 10 діб, виробляючи кожні 2 дні висіваючи на 5% кров'яний агар.
Дослідження інших матеріалів. При дослідженні матеріалів, забруднених великою кількістю сторонніх мікробів (випорожнення, мокротиння), рекомендується застосовувати агар з 7,5% натрію хлориду, до якого додають 10% теплого знятого молока (середа Петрович). На такому агарі зростання сторонньої мікрофлори значно пригнічується.
Фаготипування. При фаготипуванні використовують набір типових стафілококових фагів, що складаються з 21 фага, розділених на чотири групи. Кожен типовий фаг здатний розмножуватися тільки на відповідному штамі стафілокока. Фаготипування стафілококів має особливе значення при са-
санітарно-бактеріологічному дослідженні харчових продуктів для виявлення джерела інфекції та встановлення епідемічних зв'язків.
Специфічна терапія та хіміотерапія. Стафілококова вакцина широко застосовується для лікування рецидивуючих та хронічних інфекцій, наприклад, при фурункульозі. Для профілактики цих захворювань застосовується анатоксин.
При лікуванні стафілококових інфекцій успішно використовують також хіміотерапевтичні препарати сульфаніламідного ряду (норсульфазол, сульфодимезин та ін.), антибіотики (пеніцилін у великих дозах, еритроміцин, оксацилін та ін.), стафілококовий бактеріофаг (при ураженнях). При важких стафілококових сепсисах рекомендуються гіперімунна антистафілококова плазма та гамма-глобулін, які отримують від донорів, імунізованих анатоксином.

Мікроскопія золотистого стафілокока. Виявлення скупчень грампозитивних коків і поліморфно-нуклеарних лейкоцитів для дослідження забарвлених мазків клінічного матеріалу може бути основою попереднього діагнозу. Слід пам'ятати, що результати мікроскопії не можна вважати достатніми для видачі остаточного висновку.

Виділення золотистого стафілокока

Посів золотистого стафілококапроводять на прості живильні середовища, зазвичай на тіо-гліколеве середовище та КА. Якщо існує ризик контамінації зразка, застосовують диференційно-діагностичні середовища. Найчастіше використовують молочно-сольовий (чи молочно-жел-точно-сольовий) агар і сольовий агар з манітом, ними зростання контамінуючої мікрофлори пригнічує висока концентрація NaCl. Крім того, на молочно-сольовому агарі (МСА) добре проявляється здатність до пігментоутворення та розкладання лецитину (лецитовітелазна активність). Останнім часом широке поширення як диференціально-діагностичне середовище знайшов агар з колістином і налідіксової кислотою.

Через 18-24 год золотистий стафілокок (S. aureus) утворює гладкі опуклі каламутні колонії діаметром близько 4 мм. Бактерії синтезують жовтий пігмент, колір колоній варіює від білого до оранжевого. На КА колонії S. aureus оточені зоною повного гемолізу (рис. 1, див кольорове вклеювання).

Стафілококидобре ростуть на бульйоні, спочатку викликаючи його рівномірне помутніння, а потім утворюючи пухкий пластівцевий осад. Вони дають дуже характерне зростання у желатині; через 24-28 год (поряд з рясним зростанням по ходу уколу мікробіологічної голки) спостерігають початкове розрідження середовища, а на 4-5 добу утворюється відкрита вниз вирва, заповнена розрідженим середовищем.

Для внутрішньовидового диференціювання золотистого стафілокока (S. aureus) застосовують коагулазний тест (на наявність згортаючого фактора), позитивний у 95% ізолятів (рис. 12-3). Існує ще кілька ознак, що диференціюють.

Здатність ферментувати маніт в анаеробних умовах.
Лецитовителазна активність - утворення перламутрового преципітату-«віночка», що оточує колонії, що виросли на середовищах з додаванням яєчного жовтка. Преципітат складається з фосфорилхоліну, що утворюється з лецитину яєчного жовтка під дією ферменту.
Здатність синтезувати термостабільну ДНКазу.
Здатність аглютинувати сенсибілізовані еритроцити барана (останній тест дозволяє виявити білок А, згортаючий фактор або обидва препарати).

Для експрес-ідентифікації золотистого стафілокока (S. aureus) застосовують тест латекс-аглютинації з використанням комерційних наборів частинок латексу, навантажених AT, наприклад Staphylatex (American Microscan).