Аналіз на ВІЛ шляхом ІФА: точність, достовірність. Аналіз на віч четвертого покоління ІФА 4 покоління на віч 7 тижнів

Скринінгове дослідження на ВІЛ допомагає своєчасно виявити патологію та розпочати її лікування. Виявлення передбачуваного захворювання чи порушення здійснюється завдяки тесту, який швидко визначає наявність чи відсутність проблеми. Тест на ВІЛ 4 покоління допомагає діагностувати патологію на ранніх етапах, коли почалися виділятися антитіла до вірусу.

Характеристика

Аналіз на ВІЛ 4 покоління є чутливим до антитіл та антигену р24. У тестовій системі для роботи використовується вірус, що пройшов ультразвукову обробку. Антигени виявляються через 30 днів після визначення РНК за допомогою методу ПЛР.

ВІЛ тест-системи 4 покоління є для лікарів корисними через один-два місяці після зараження вірусом та вважаються найінформативнішими на ранніх термінах інфікування. Тест має дуже високу чутливість до вірусу на початкових стадіях зараження. У деяких випадках ІФА виявляє СНІД через тиждень чи півтора після інфікування, проте стандартний період – від двох тижнів до місяця.

Тест-система 4 покоління на ВІЛ виявляє антиген, який є частиною вірусу та визначається в крові раніше, ніж антитіла, яким потрібен час для утворення. Умовно званий період вікна або терміни для тесту на ВІЛ 4 покоління дуже маленькі. Після того, як при тестуванні виявляється велика кількість антитіл проти вірусу, р24 антиген вже не проявляється, тому що зв'язується з іншими білком.

Тест на ВІЛ 4 покоління, достовірність якого вважається нині практично 100%, часто застосовується у діагностиці імунодефіциту. Для правильного проходження дослідження необхідно дотримуватись рекомендацій щодо підготовки до аналізу:

• дослідження проводиться у ранковий час;
• кров здається із вени;
• перед забором крові не слід їсти що-небудь, не можна пити ліки.

Тимчасові інтервали для досліджень

Пройти тест на ВІЛ 4 покоління за місяць вважається найоптимальнішим варіантом, щоб отримати достовірний результат. У цей період одночасно знижується кількість білка р24 і підвищується рівень антитіл, що виробляються, якщо відбулося зараження.

Необхідно враховувати різні моменти, які впливають результат дослідження: стан імунної системи пацієнта, перенесені інфекційні захворювання, прийом сильнодіючих препаратів та інші. У таких ситуаціях дослідження проводиться повторно (кілька разів з урахуванням часових рамок) за призначенням імунолога.

Точність тестів на ВІЛ 4 покоління обумовлена ​​високою чутливістю та специфічністю. Чутливість - це кількість правильно визначених результатів із заздалегідь відомих позитивних (інфікованих зразків: 100% зі 100). Специфічність - це частина правильно досліджених тестом зразків, наперед негативних (якщо на 1000 зразків здорової крові буде 10 «нібито інфікованих результатів», то специфічність означає у відсотках 99).

Термін здачі аналізу на ВІЛ 4 покоління після незахищеного контакту - через 3 або 4 (кров береться з вени) або 10-12 тижнів (з пальця). Повторно здається контролю через три місяці відповідно, що остаточним терміном перевірки. Повторне обстеження через 6 місяців призначається лікарем за показаннями.

Тест четвертого покоління на ВІЛ виявляє антитіла одночасно до вірусів першого та другого типу. Він є найефективнішим методом діагностики у ранньому періоді передбачуваного зараження (відбувається найактивніша фаза поширення вірусу). Використовується для всіх випадків, коли був зіткнення з вірусом.

Відгуки та коментарі

Світлана- 05 вер 2018, 11:20

Катя, та яка профілактика? Просто не зустрічатись близько з незнайомими людьми. Пити імуностимулюючі ліки. У принцепі – все. Та й правила особистої гігієни щодня.

У більшості хворих антитіла до ВІЛ виявляються через 6-12 тижнів після зараження з використанням тест-систем перших поколінь та через 3-4 тижні з використанням тест-систем третього покоління, що працюють за принципом сендвіч-ІФА з двома антигенами. Однак ВІЛ-інфекція виявляється вже через 2 тижні після зараження шляхом аналізу антиген p24 і вже через 1 тиждень - шляхом аналізу на вірусну РНК. Іншими словами, період вікна можна скоротити до 2 тижнів та більше за допомогою комплексного діагностичного підходу. Капсидний антиген p24 з'являється в крові при бурхливій реплікації вірусу в гострій пропасниці ВІЛ-інфекції і в цей період легко виявляється за допомогою простого і порівняно дешевого ІФА.

Якщо стоїть завдання виявити всіх ВІЛ-інфікованих, зокрема осіб із ранніми стадіями інфекції, необхідно використовувати весь арсенал аналізів: на антитіла, на антигени і РНК. Проте тестування на вірусну РНК дорого коштує, потребує великих трудовитрат і недоступне для більшості лабораторій. І все ж ті лабораторії, в яких є обладнання для ІФА, здатні виявляти більшість випадків ВІЛ-інфекції за умови тестування проб як на антитіла до ВІЛ, так і антиген p24.

Наприкінці 1990-х років. з'явилися тест-системи для паралельного ІФА на антитіла до ВІЛ та антиген p24, які зняли необхідність проведення окремих аналізів. Розроблено та впроваджується нове покоління комбінованих тест-систем для одночасного виявлення антитіл до ВІЛ та антигенів ВІЛ.

Перевага комбінованих аналізів у тому, що вони займають менше часу, вимагають менших трудовитрат і більш вигідні, ніж окремі аналізи. Комбіновані тест-системи мають високу аналітичну чутливість як за рахунок застосування сендвіч-ІФА з двома антигенами для виявлення антитіл до ВІЛ, так і за рахунок одночасного виявлення антигену p24.

В даний час на ринку є 8 комбінованих тест-систем четвертого покоління, що пройшли клінічні випробування: VIDAS HIV DUO Ultra (bioMérieux; Марсі-л'Етуаль, Франція); Enzymun-Test-HIV-Combi (Boehringer; Мангейм, Німеччина); Vironostika HIV Uni-Form II Ag/AB (Organon Teknika; Бокстел, Нідерланди); AxSYM-HIV Ag/AB (Abbott Laboratories; Ебботт-Парк, Іллінойс, США); Enzygnost HIV Integral (Dade Behring; Марбург, Німеччина); Genescreen Plus HIV Ag-AB (Bio-Rad) і COBAS Core HIV Combi (Roche Diagnostics; Мангейм, Німеччина); Elecsys-HIV Combi (Boehringer; Мангейм, Німеччина). В останній тест-системі застосований електрохемілюмінесцентний сендвіч-метод із двома антигенами; аналіз займає 18 хвилин; специфічність за даними випробувань на госпіталізованих хворих становить 998%. Ця тест-система дозволяє діагностувати ВІЛ-інфекцію на 5 днів раніше, ніж найчутливіші тест-системи на антитіла до ВІЛ. Існує ще одна комбінована тест-система без торгової марки для ІФА на антитіла та антиген p24 з чутливістю всього 99,5% та специфічністю 94,8%.

Комбінований аналіз на антитіла та антиген для виявлення нещодавньої та тривало існуючої ВІЛ-інфекції виправданий не лише при тестуванні донорів крові, а й у багатьох клінічних ситуаціях. Ранній діагноз ВІЛ-інфекції шляхом виявлення антигену p24 дозволяє негайно розпочати лікування, провести консультування хворого та вжити заходів для зниження ризику передачі інфекції. Завдяки здатності виявляти антиген p24 тест-системи четвертого покоління, дозволяють діагностувати ВІЛ-інфекцію на ранніх стадіях. Ці тест-системи дуже корисні для діагностики нещодавньої та тривало існуючої ВІЛ-інфекції у лікарняних та незалежних клінічних лабораторіях та діагностичних центрах (як бюджетних, так і комерційних). До таких закладів нерідко звертаються пацієнти, ризик ВІЛ-інфекції у яких значно вищий, ніж у донорів крові. Для раннього виявлення ВІЛ-інфекції таких пацієнтів потрібні тест-системи з високою аналітичною чутливістю.

Важливо відзначити, що висока аналітична та епідеміологічна чутливість більшості тест-систем четвертого покоління, доведена у випробуваннях на хворих з різних популяцій, хворих на сероконверсію та хворих на різні підтипи ВІЛ, робить ці тест-системи незамінними для діагнозу як недавньої, так і тривало існуючої. ВІЛ-інфекції в різних ситуаціях. Так, наприклад, у клінічних лабораторіях бюджетних установ охорони здоров'я тестування крові на антигени ВІЛ зазвичай не проводиться (це прерогатива станцій переливання крові), і тому при стандартному тестуванні на антитіла до ВІЛ випадки недавньої інфекції можуть бути пропущені. Було показано, що виявлення інфекції на ранніх стадіях дає підстави вчасно розпочати антиретровірусну терапію, що підвищує її ефективність. Крім того, з'являється можливість своєчасно проконсультувати пацієнта, правильно організувати його ведення та запобігти передачі ВІЛ-інфекції.

Експрес-тести:Це клас тест-систем, що дають результат швидше, ніж за 30 хвилин. Експрес-тести для виявлення специфічних антитіл до ВІЛ з'явилися наприкінці 1980-х, а на початку 1990-х років. набули популярності. Завдяки вдосконаленню технології виробництва експрес-тести стали не менш точними за ІФА (за умови, що аналіз проводиться акуратно, кваліфікованим співробітником). Однак через уявну простоту експрес-тестів персонал часто припускається помилок. Наприклад, при внесенні реагентів піпетки не завжди тримають вертикально (як зазначено в інструкції), що порушує співвідношення обсягів реагентів. Ще одне джерело помилок – прагнення багатьох лаборантів одночасно провести аналіз кількох проб. Через це не витримується час етапів аналізу.

При правильному виконанні експрес-тести на антитіла до ВІЛ дають надійні результати і можуть використовуватися в різних медичних закладах і клінічних ситуаціях. Зокрема, їх застосовують у приймальних відділеннях, кабінетах лікарів, амбулаторіях, патологоанатомічних відділеннях, моргах, пунктах переливання крові, а також скрізь, де потрібне термінове тестування на ВІЛ (наприклад після контакту медичного працівника з можливим джерелом інфекції).

Експрес-тести на ВІЛ незамінні для тестування породіль, за якими не проводилося допологове спостереження (тобто породіль з нез'ясованим ВІЛ-статусом). Показано, що антиретровірусна терапія (зокрема зидовудином) ефективно знижує ризик вертикальної передачі ВІЛ і що таке лікування в максимально ранні терміни необхідне матері, а потім і новонародженому. Експрес-тестування вагітної на ВІЛ у передпологовому періоді дозволяє у разі виявлення антитіл розпочати лікування до пологів.

Опис

Підготовка

Показання

Інтерпретація результатів

Опис

Метод визначення Імуноферментний аналіз (ІФА).

Досліджуваний матеріалСироватка крові

Доступний виїзд додому

Комбіноване виявлення антитіл до ВІЛ типів 1 та 2 та антигену р24 ВІЛ, якісний тест.

Увага. При позитивних і сумнівних реакціях термін видачі результату може бути збільшений до 10 робочих днів. ВІЛ (вірус імунодефіциту людини), що викликає СНІД (синдром набутого імунодефіциту) – належить до сімейства ретровірусів. Передається від людини до людини при використанні забруднених голок та шприців для внутрішньовенного введення наркотиків або терапевтичних процедур, при сексуальних контактах як гетеро, так і гомосексуальних. Передача вірусу може статися при переливанні інфікованої крові та її продуктів, донорстві органів чи насіннєвої рідини, у медичних працівників – при пораненні інфікованими голками чи інструментами. Зараження ВІЛ можливе шляхом передачі від інфікованої матері дитині (вертикальний шлях), хоча сучасні методи профілактики із застосуванням антиретровірусної терапії, при виконанні всіх рекомендацій, дозволяють знизити такий ризик до мінімуму.

Процес взаємодії вірусу з клітиною включає ряд стадій: зв'язування вірусу з клітиною, звільнення його від оболонки, проникнення в цитоплазму, синтез ДНК вірусної РНК, вбудовування вірусної ДНК в геном клітини-господаря. Після цього починається латентна стадія інфекції. У такому стані провірусна ДНК може існувати деякий час, не виявляючи активності та не впливаючи на життєдіяльність клітини-господаря. Поки немає експресії вірусних білків, немає імунної відповіді на вірус. Антитіла до ВІЛ, що характеризують імунну відповідь організму, з'являються після активації вірусної ДНК та початку активного розмноження вірусу. Тривалість латентного періоду залежить від низки чинників, включаючи індивідуальні генетичні особливості організму.

Антитіла до ВІЛ можуть з'явитись, починаючи з другого тижня після інфікування; їх зміст збільшується протягом 2-4 тижнів і зберігається протягом багатьох років. У 90-95% інфікованих вони з'являються в перші три місяці після зараження, у 5-9% - у період від трьох до шести місяців, у 0,5-1% - у пізніші терміни.

У перші тижні інфекції, ще до появи антитіл до вірусу (тобто до сероконверсії), у зразках сироватки чи плазми можна виявити присутність антигенів ВІЛ, зокрема його капсидного білка р24. Пізніше, після сероконверсії, він зазвичай стає недетектованим.

Комбіновані тест-системи 4-го покоління, до яких належить тест HIV Ag/Ab Combo (Architect, Abbott), виявляють як антитіла до ВІЛ 1 та 2 типів, так і антиген р24 ВІЛ, що дозволяє проводити раннє виявлення інфекції. До особливих характеристик скринінгового тесту, що застосовується в лабораторії ІНВІТРО, для виявлення ВІЛ-інфекції варто віднести високу специфічність дослідження (> 99,5%); 100% чутливість аналізу до антитіл, характерних для періоду сероконверсії, та чутливість тесту до антигену р24 близько 18 пг/мл.

Порядок проведення лабораторного обстеження на ВІЛ суворо регламентований наказами МОЗ РФ і включає в себе етап скринінгового (відбіркового) дослідження наявності антитіл до ВІЛ імуноферментними (ІФА) методами, дозволеними до використання, і етап верифікаційного (підтверджуючого) більш розгорнутого дослідження в лабораторії. Слід зазначити, що навіть найкращі скринінгові ІФА-системи не гарантують 100% специфічності, тобто існує певна ймовірність отримання неспецифічних, хибнопозитивних результатів, пов'язаних з особливостями сироватки крові пацієнта. Тому позитивний результат скринінгового ІФА обстеження може не підтвердитись у підтверджуючих тестах, після чого пацієнту видадуть негативний чи невизначений результат. При невизначеному результаті підтверджуючого дослідження, тестування слід повторити в динаміці через 2-3 тижні.

Лабораторна діагностика ВІЛ-інфекції у дітей, народжених від ВІЛ-інфікованих матерів, має свої особливості. У крові до 18-ти місяців із народження можуть циркулювати материнські антитіла до ВІЛ (класу IgG). Відсутність антитіл до ВІЛ у новонароджених не означає, що вірус не проник через плацентарний бар'єр. Діти ВІЛ-інфікованих матерів підлягають лабораторно-діагностичному обстеженню протягом 36 місяців після народження.

Підготовка

Спеціальної підготовки не потрібно. Рекомендується взяття крові не раніше ніж через 4 години після останнього прийому їжі. Із загальними рекомендаціями для підготовки до досліджень можна ознайомитись. Доцільно проводити дослідження на виявлення антигену та антитіл до ВІЛ не раніше, ніж через два тижні після можливого інфікування, з повторенням його через три та шість тижнів у разі негативного результату. Оформлення заявок для проведення досліджень у ТОВ «ІНВІТРО» здійснюється за паспортом або документом, що його замінює (міграційна карта, тимчасова реєстрація за місцем проживання, посвідчення військовослужбовця, довідка з паспортного столу при втраті паспорта, реєстраційна карта обліку з готелю). Пред'явлений документ обов'язково повинен містити інформацію про тимчасової чи постійної реєстрації біля РФ і фотографію. За відсутності паспорта (документа, що його замінює) пацієнт має право оформити анонімну заявку для здачі біоматеріалу. При анонімному обстеженні, заявці та отриманому від клієнта зразку біоматеріалу присвоюється номер, відомий лише пацієнту, та медперсоналу, який оформляв замовлення. ! Результати досліджень, виконаних анонімно, не можуть бути представлені для госпіталізації, професійних оглядів та не підлягають реєстрації в ОРУІБ.

Показання до призначення

• Збільшення лімфатичних вузлів понад дві області.
• Лейкопенія з лімфопенією.
• Нічна пітливість.
• Різке схуднення незрозумілої причини.
• Діарея більше трьох тижнів неясна причина.
• Гарячка неясної причини.
• Планування вагітності
• Передопераційна підготовка, госпіталізація.
• Виявлення наступних інфекцій або їх поєднань: туберкульоз, маніфестний токсоплазмоз, герпесвірусна інфекція, що часто рецидивує, кандидоз внутрішніх органів, повторні невралгії герпес-zoster, викликана мікоплазмами, пневмоцистою або легіонелами пневмонія.
• Саркома Капоші у молодому віці.
• Випадкові статеві контакти.

Інтерпретація результатів

Інтерпретація результатів досліджень містить інформацію для лікаря і не є діагнозом. Інформацію з цього розділу не можна використовувати для самодіагностики та самолікування. Точний діагноз ставить лікар, використовуючи як результати даного обстеження, і потрібну інформацію з інших джерел: анамнезу, результатів інших обстежень тощо.

Одиниці вимірювання у Незалежній лабораторії ІНВІТРО: тест якісний. Форма подання результатів: за відсутності антитіл до ВІЛ 1 та 2 та антигену р24 видається відповідь «негативно». У разі виявлення антитіл до ВІЛ або антигену у скринінговому імуноферментному тесті пробу сироватки відправляють для дослідження підтверджуючим методом імуноблоту до міського центру СНІД, який верифікує позитивні та невизначені результати.

Позитивний результат:

1. ВІЛ інфекція;
2. хибнопозитивний результат, що вимагає повторних або додаткових досліджень *);
3. дослідження неінформативно у дітей до 18 місяців, народжених від ВІЛ-інфікованих матерів.

*Специфічність скринінгової тест-системи Антитіла до ВІЛ 1 та 2 та антиген ВІЛ 1 та 2 (HIV Ag/Ab Combo, Abbott), за оцінками, представленими виробником реагентів, становить близько 99,6% як у загальній популяції, так і у групі пацієнтів з потенційними інтерференціями (інфекції HBV, HCV, Rubella, HAV, EBV, HNLV-I, HTLV-II, E.coli, Chl.trach. та ін., аутоімунні патології (включаючи ревматоїдний артрит, присутність антинуклеарних антитіл), вагітність, підвищений рівень IgG, IgM, моноклональні гаммапатії, гемодіаліз, множинні гемотрансфузії).

Дослідження зразків крові за допомогою ІФА на ВІЛ-інфекцію - це один із ранніх і достовірних методів діагностики. Імуноферментний тест складається з небагатьох досліджень поряд з ПЛР, які з великим ступенем ймовірності підтверджують або спростовують такий страшний діагноз, як ВІЛ-інфекція або СНІД.

З моменту виявлення перших випадків зараження вірусом імунодефіциту біля радянського простору, а це 1983 рік. Ліки, які повністю зцілювали б цю інфекцію, а також вакцина до неї, не були винайдені, але цей процес знаходиться в стадії активної розробки. А поки що тільки рання діагностика ВІЛ-інфекції дозволяє тримати патологічний процес під контролем.

Вірус імунодефіциту у людини відноситься до ретровірусів, які зумовлюють повільний перебіг захворювання. Проникаючи в організм, вірус імунодефіциту впливає насамперед на лімфоїдну тканину. Здоровий імунітет виробляє Т-лімфоцити для того, щоб розпізнати вірусного агента, що знову прибув. Після чого дати інформацію антитілам, за якими ознаками дізнатися про вірус імунодефіциту і знищити його. Процес «пізнання» імунодефіциту вірусу відбувається за допомогою білків-рецепторів CD4. Але саме на цьому етапі спостерігається щось дивне, те, що вже багато років не дозволяє перемогти чуму XX століття.

Клітина імунітету CD4 для розпізнавання чужорідного агента вступає в контакт з вірусом імунодефіциту. У цей момент вірус імунодефіциту прикріплюється до мембрани лімфоциту, зливається з оболонкою рецептора та впроваджує в клітину імунітету капсулу зі своєю генетичною інформацією та специфічними вірусними білками. І клітина, відправлена ​​на обчислення вірусу імунодефіциту, з цього часу сама стає зараженою. Але відбувається все, на жаль, не з однією клітиною, а дуже великих масштабах. Імунна система людини у відповідь вже на «колишні свої», а нині заражені клітини створює нові антитіла. Але віруси імунодефіциту, за описаною раніше схемою, знову і знову викликають захоплення клітин-захисників.

Таким чином, імунітет людини потрапляє до замкнутого кола. Допомогти організму можна лише, якщо проводити високоактивну антиретровірусну інфекцію (ВААРТ). А також перейти на здоровий спосіб життя і харчування, що звільнить великі ресурси імунітету від зайвої роботи. Вчені всього світу об'єднали свої зусилля та постійно проводять дослідження у пошуках ефективних ліків проти ВІЛ-інфекції.

Нещодавно був проведений експеримент з білком ССR5, який забезпечує вроджену несприйнятливість організму певної частини людей до зараження ВІЛ-інфекцією. Вчені піддали кров'яну субстанцію людей добровольців генної терапії, щоб впровадити ССR5 у клітини Т-хелперів. У всіх підопічних це спричинило масштабне зниження числа ретровірусних ДНК. У одного пацієнта вірус імунодефіциту цей метод дозволив ліквідувати повністю. На підставі даного експерименту можна поки що тільки припустити в поодинокому випадку про успішну перемогу над страшною чумою XX століття.

Починаючи з 2016 року ця діяльність просунулась значно вперед. Отримано приголомшливі за ефективністю результати дев'яносто відсоткового знищення вірусу імунодефіциту за допомогою атакуючих антитіл, що виділяються м'язовою тканиною в обхід захопленого імунітету. Для цього в м'язову тканину піддослідних живих істот вживляли спеціальний ген, який продукує ці клітини-кілери для знищення ВІЛ-інфекції. Але на людях цей метод поки що не застосовувався, хоча планується найближчими роками.

Тим більше немає сенсу падати духом. А краще якомога раніше виявити вірус імунодефіциту, що можна зробити за допомогою ІФА, якщо мав місце ризик зараження. І у разі підтвердження діагнозу, підтримувати свій імунітет за допомогою ВААРТ доти, доки нові ліки від ВІЛ-інфекції будуть оприлюднені.

Діагностика ВІЛ-інфекції

Метод ІФА на ВІЛ-інфекцію має на меті виявлення у зразку крові людини антитіл до вірусу імунодефіциту. Потрапляючи в організм, ретровіруси до групи яких належить ВІЛ-інфекція, не відразу починають активне захоплення імунних клітин CD4 (Т-лімфоцитів). Але чекати, доки агресивні агенти почнуть смертельну діяльність в організмі не варто. Не секрет, що при будь-якому захворюванні, і ВІЛ-інфекція не є винятком, чим раніше розпочато терапію, тим ефективніше лікування.

Коли справа стосується вірусу імунодефіциту людини, випадки повного лікування офіційно не зафіксовано. Але це зовсім не означає, що потрібно опустити руки і пустити захворювання на самоплив. З ВІЛ-інфекцією люди живуть до 75–80 років за умови виявлення на початковій стадії та постійної підтримуючої терапії.

p align="justify"> Метод імуноферментної діагностики ВІЛ-інфекції має високу достовірність близько 97-99%. Але саме ця незначна частина в 1-3% може давати хибнопозитивний або хибнонегативний результат діагностики ВІЛ-інфекції за допомогою ІФА. Для цих цілей, щоб остаточно підтвердити або спростувати показання імуноферментного аналізу, застосовується аналіз, що називається імуноблот (ІХ).

Що являють собою методи ІФА та ІБ на ВІЛ-інфекцію

Імунноферментний метод на ВІЛ-інфекцію 4-го покоління спрямований не тільки на пошук та ідентифікацію патогенних клітин, але й на встановлення їх чисельності. Отже, один імуноферментний тест поєднує в собі якісне та кількісне дослідження. Метод ІФА 4-го покоління на ВІЛ-інфекцію на строк від шести тижнів з моменту ймовірного зараження покаже 100% високу достовірність результатів.

В основі імуноферментного дослідження лежить взаємодія специфічних антитіл та споріднених ним антигенів. Завдяки спеціальному ферменту і відбувається утворення сукупності «антиген-антитіло». Щоб здійснити цю реакцію з виявлення імуноглобулінів до ВІЛ-інфекції, в полістеролову панель з 96 лунками, в яких у твердій формі знаходяться рекомбінантні білки (сорбовані), поміщають зразок крові. Які опинилися в ємності із сироваткою крові антигени чи антитіла розпізнають відомий їм об'єкт і утворюють із нею сполуку «АТ-АГ». Для встановлення антитіл до вірусів імунодефіциту 1 та 2 типів застосовується також тест ДС ІФФ на ВІЛ АГ-АТ.

Переваги імуноферментного методу на ВІЛ-інфекцію 4-го покоління:

• Висока достовірність, понад 96%. Хибні результати найчастіше є причиною не самого аналізу, а неправильної підготовки або нещодавно перенесеного респіраторного захворювання.
• Визначення як наявності, і чисельності імуноглобулінів.
• Можливість відстежувати результат під час проведення терапії ВІЛ-інфекції.
• Швидкість одержання результатів аналізу на ВІЛ-інфекцію, яка становить кілька годин, якщо проводиться у діагностичному центрі.
• Аналіз на ВІЛ-інфекцію чотири, імуноферментна реактивність якого значно вища за попередників, інформативний у період серологічного вікна вірусу імунодефіциту.

Імунний блотинг є скринінгом і призначається визначення типу антигену. Скринінгове дослідження ІБ використовують як тест, що верифікує, при ВІЛ-інфекції через 5–7 тижнів після проведення ІФА. Метод ІБ заснований на застосуванні електрофорезу для поділу антигенів вірусів імунодефіциту. Процес поділу антигенів дає можливість виявляти специфічні імуноглобуліни до кожного конкретного ВІЛ-інфекції.

Імуноблотинг застосовують, коли імуноферментний тест ВІЛ-інфекції два рази поспіль показує хибнопозитивний або хибнонегативний результат. Підозри можуть виникнути за відсутності або, навпаки, наявності характерних симптомів ВІЛ-інфекції. Хоча тут можуть виникати різні варіації.

Розшифровка результатів ІФА на інфекцію ВІЛ-інфекцію

У випадку, коли ІФА плюс підтверджується позитивним скринінгом ІБ, сумнівів не виникає, у пацієнта в організмі присутній вірус імунодефіциту. Але якщо, наприклад, ІФФ на ВІЛ позитивний, а імуноблот негативний, роблять висновок про інфікування «мінус», тобто про його відсутність.

Тільки в такій ситуації пацієнта все одно відправляють на додаткове обстеження, щоб виключити вірус імунодефіциту.

А при імуноферментному аналізі на ВІЛ 4 покоління «мінус», а імуноблотінгу позитивному, можливо, в організмі присутня інша інфекція. Можливо у людини якесь аутоімунне захворювання, онкологічний процес, буває псоріаз шкіри або суглобів дає хибнопозитивні результати як ІФА, так і ІБ.

Ще такий варіант, коли імуноферментний тест на ВІЛ-інфекцію показує результат «мінус» та імунноблот також зі значенням «мінус», тут залишається лише порадіти через відсутність вірусу імунодифіциту. Але за наявності специфічних ознак, властивих ВІЛ-інфекції або якщо людина полягає в тісному контакті з ВІЛ позитивним пацієнтом. Тоді також буде необхідно провести додаткову діагностику, наприклад полімеразну ланцюгову реакцію (ПЛР). До того ж за сумнівних показників «мінус» або «плюс», пацієнту рекомендується перездати кров через 4, а краще 6 місяців.

Норма та відхилення числа Т-лімфоцитів при ВІЛ-інфекції:

• Норма Т-клітин від 1000 до 2900 мкл.
• ранній СНІД від 500 до 200 мкл.
• СНІД пізніше 200 мкл.

Хворобу легше запобігти, ніж лікувати – це все відома мудрість. З часів поширення в суспільстві вільних вдач з'явилася і велика кількість різних венеричних захворювань. ВІЛ-інфекції та СНІД зараховуються поки що до невиліковних захворювань. Спосіб передачі в основному статевим шляхом та через кров. На всі сто відсотків захиститися від жодної хвороби неможливо. Існує маса непередбачених ситуацій, навіть у людей, які ведуть моральний і охайний спосіб життя. У ситуації підвищеної небезпеки зараження ВІЛ та іншими небезпечними інфекціями неоціненну користь має діагностика крові.

Вконтакте

Інфекція, спричинена вірусом імунодефіциту людини, – серйозний діагноз. Помилки при діагностиці можуть призвести до плачевних наслідків. Аналіз ІФА на ВІЛ – найбільш доступний метод дослідження, але не завжди він інформативний.

ІФА – імуноферментний аналіз. Завдання методу ІФА – виявлення антитіл до вірусу імунодефіциту у біологічному матеріалі. За допомогою методу можна відстежити присутність у рідині не самих вірусів, але лише антитіл, що виробляються у відповідь на їхню присутність. Імуноферментний аналіз широко використовується при діагностиці ЗПСШ. Він допомагає виявити, що передаються статевим шляхом.

Існує кілька видів ІФА: прямий варіант, опосередкований варіант, метод сендвіча. У будь-якому випадку методика заснована на визначенні наявності антитіл, які є індикатором проникнення чужорідного агента. Щоб виявити ці "мітки", біологічний компонент обробляють ферментами.

Імуноферментний аналіз визначає антитіла з точністю 96-98%, похибка незначна. Вона становить 2 – 4%.

ІФА – метод діагностики ВІЛ

ІФА аналіз на ВІЛ – перший етап діагностики. Антигенами вірусу імунодефіциту є протеїни p24, p15, p17, p31 і глікопротеїни gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.

Щоб знайти вірусний білок, беруть порцію крові з вени. Зразок, спрямований дослідження крові ІФА, обробляють імуноферментними реагентами. З крові виділяють сироватку. Якщо під час дослідження виявляються , отже, у крові вже є вірус.

Кров здають строго натще. За 2 дні до аналізу не рекомендується їсти жирну їжу та вживати алкоголь. Слід за 14 днів припинити прийом противірусних препаратів.

Переваги методу:

• порівняно невелика вартість;
• висока стабільність реагентів;
• висока чутливість;
• короткий термін;
• Мінімальний вплив людського фактора.

Сучасні тест-системи для ІФА виробляють за світовими стандартами. Це підвищує точність способу.

Імуноферментний аналіз який завжди дає достовірні результати. Після влучення вірусу в кров починається латентна (прихована) стадія розвитку. Період, поки віруси почали розмножуватися, і антитіла ще сформовані, називається «час серонегативного вікна». Робити ІФА на цьому етапі безглуздо. Якщо зараження відбулося, результат буде. Як швидко вірус себе виявить, залежить від того, скільки небезпечних клітин потрапило в організм. При незахищеному статевому акті чи переливанні зараженої крові цей термін буде мінімальним.

Для високої достовірності ІФА ВІЛ дослідження проводять тричі. Терміни здачі ІФА на вірус імунодефіциту людини:

• через 6 тижнів після ймовірного контакту,
• через 3 місяці,
• через півроку.

ІФА 4 покоління на ВІЛ – метод, найінформативніший на ранніх термінах зараження. Його можна проводити вже через 1 місяць після передбачуваного інфікування. Тест є дорогим у порівнянні з аналогом 3-го покоління. Тому у державних медустановах він використовується як додатковий метод діагностики. Безкоштовно проводиться тест 3. Якщо за його підсумками однозначної відповіді не можна дати, пацієнта направляють на ІФА 4 покоління.

Важливо!Відразу після інфікування людина стає заразною. Він небезпечний для оточуючих, навіть коли ще не знає про свій діагноз!

Якщо за ІФА виявлено антитіла до антигенів ВІЛ, необхідно проводити додаткові дослідження. До таких належить. Достовірність цього – 80%. За допомогою ПЛР досліджують кров, сперму та вагінальні виділення. Біологічну рідину розщеплюють у медичному реакторі, потім обробляють ферментами. У результаті отримують дані про те, яка концентрація клітин ВІЛ у рідкому середовищі. Через велику похибку (20%) при позитивному результаті додатково проводять імунний блот.

Наступний етап діагностики - тест Комбо (або імунний блот). Це високочутливе дослідження (98% достовірності), яке проводять, якщо за 6 місяців результати ІФА неоднозначні.

Розшифровка результатів ІФА

Час розшифровки становить від 24 до 48 годин. Якщо необхідно отримати інформацію терміново (потрібне хірургічне втручання), розшифрування проводять за 2 години. У провінційних медичних пунктах який завжди є необхідні реагенти. Пробу беруть за місцем звернення, потім її передають до обласного центру. За таких обставин результат можна дізнатися через 1-2 тижні.

Результат імуноферментного аналізу може бути або позитивним або негативним; інших варіантів немає.

Навіть якщо при первинному та повторному ІФА результат був позитивним, пацієнта не можна визнати ВІЛ-інфікованим. Можлива похибка. Причини хибно-позитивного результату:

• хронічне захворювання;
• тривалі інфекційні захворювання;
• вагітність.

Тому результат аналізу має бути уточнено додатковими дослідженнями.

Якщо при проведенні імуноблотінгу на ВІЛ (реактивний), людина вважається ВІЛ-інфікованою, а отже, що вона здорова.

Клітини вірусу згодом адаптуються до призначених препаратів. Щоб контролювати тест ІФА періодично повторюють.

Іноді імуноблоттинг показує помилково-негативний результат. Вкрай рідко вірус імунодефіциту 6 місяців (і більше). Це можливо, якщо до крові потрапила незначна кількість клітин вірусу. У 0,5% від загальної кількості випадків діагностувати зараження вдається лише за рік. У 99,5% протягом півроку після інфікування під час проведення ІФА вийде достовірний результат.

Навіть під час проведення високоточних досліджень залишається можливість помилки, що становить 2%. Не слід забувати про людський чинник. Щоб унеможливити помилку, тест можна провести в 2-х різних установах.