Quindi anche immunoblot? Aggiungi il tuo prezzo al database di Kommentar. Rilevazione di anticorpi contro i virus Immune blot

ipotensione mentale, tachicardia, arretratezza, cianosi. In caso di grave interruzione, i disturbi possono sanguinare, macchiando il sangue di casa. Pechinka e spleenka per il miglioramento. Significa oliguria. La temperatura diventerà costantemente alta per 3-10 giorni. Nel sangue periferico - leucocitosi neutrofila nelle formule danneggiate. Oltre alla descrizione delle manifestazioni zagalny della peste, lo sviluppo dell'urazhennya, caratteristico delle forme cliniche di disturbi okremikh.

La forma di Shkіrna è piuttosto sviluppata (3-5%). Al punto di ingresso dell'infezione, è presente una papula, una papula, una vescicola (flikten), un vstom sieroso emorragico, otochenato da una zona infiltrata con iperemica e gonfiore. Fliktena cresce nel dolore. Con una rosetta її, è un groviglio con una crosta scura nella parte inferiore. La peste si rivela banale, guarisce più spesso, la cicatrice si riempie. Poiché la forma è accelerata dalla setticemia, ci sono pustole secondarie e virazki. Sviluppo muschioso del bubo regionale (forma shkirno-bubbonica).

La forma bubbonica è la più frequente (vicina all'80%) ed è riconosciuta come una perdita relativamente benigna. I primi giorni di malanni nella regione del regionale università linfatiche c'è una malattia acuta, che rallenta la rovina e il ringhio dei malati accettano la situazione. Il primo bubbone, di regola, è singolo, ma molti bubboni sono più preferibili. In un gran numero di vypadkіv іvrazayutsya inguine e stegovі, spesso più inguine e università shiinі lіmphatic. Razmіri bubo varia da una montagna pelosa a una mela di media grandezza. Caratteristiche di Yaskravі: forte dolore, consistenza acuta, fusione con tessuti molli, contorni levigati attraverso lo sviluppo della periadenite. Bubo inizia a formarsi per un altro giorno di malattia. Nel mondo, lo sviluppo di uno shkir sopra di esso è un chervonin, brillante, spesso un vidtinok cianotico. Sulla pannocchia, è fantastico, perché sta sfuggendo di mano, c'è una fluttuazione, i contorni diventano poco chiari. Il 10-12 ° giorno, il disturbo fa l'occhiolino: una fistola, una svolta. In caso di un buon sovraccarico di disturbi e di frequenti terapie antibiotiche, favoriscono il rischio di disintossicazione o sclerosi. Come risultato dell'infestazione ematogena dell'agente patogeno, possono formarsi bubboni secondari, che sembrano essere sempre meno piccoli, meno malati e, di regola, non marciscono. L'accelerazione minacciosa della formazione può essere uno sviluppo di una forma secondaria leggendaria o settica secondaria, ma gonfierà rapidamente una persona malata, fino a un risultato letale.

Leggenda Primordiale la forma di sviluppo è piuttosto piccola, nel periodo degli episodi nel 5-10% dei vipad ed è la più importante negli atteggiamenti e nell'importanza epidemiologica forma chiave disturbi. Obbedire è un gostro, chiassoso. Su una sindrome da intossicazione molto gravemente sviluppata, nei primi giorni c'è una tosse secca, forte offesa, Dolore al petto. La tosse diventa produttiva, a causa della comparsa di catarro, il cui numero può variare da decile a numeri magnifici, a volte ci sono cali. Il catarro, un espettorato di una pinta, uno sclop, un taglio aperto, uno sguardo sanguinante, cresce puramente storto, per vendicare la maestà di un certo numero di batteri della peste. Chiama la vittoria di una ricca consistenza - uno dei segni diagnostici. Dati fisici della metrica: una piccola velocità del suono di percussione sulla parte interessata, con auscultazione di sibili poco chiari, ma chiaramente non appare al campo arretrato, importante del malato. Il periodo termale è caratterizzato da accumuli di cattiva salute, cianosi, sviluppo del sopore, accumulo di leggende e . La presa arteriosa cade, il polso è in parte e diventa filiforme, il cuore è sordo, l'ipertermia si trasforma in ipotermia. Per tutta la durata della malattia, 2-6 dib finiranno in modo letale. Con un'assunzione precoce di antibiotici, la malattia è buona, c'è poco

m'ya yomu SNID V'yacheslav Zalmanovich Tarantul

Immunoblotting - un metodo indiretto di pre-trattamento

Krim IPA in fiale cantanti per testare l'infezione da VIL in una procedura vikorist chiamata "immunoblotting" o "immune blot" (a volte lo chiamano "western blot"). Per la raccomandazione dell'immunoblotting VOOZ da testare nella diagnosi di infezione da VIL in qualità del metodo esperto preliminare, che è colpevole di confermare i risultati dell'IFA. Considera l'utilizzo del metodo di conversione di un risultato positivo in IPA, se sei più sensibile e specifico, se vuoi che sia più flessibile e costoso. Ale persh nіzh firma il virok residuo di paciєntovі, l'auto è colpevole di essere stata capovolta nella correttezza della diagnosi. Il cibo per la piegatura e la strada non può essere eccezionale qui.

Sia per i premi, sia per il metodo di vykonannya prima dell'immun blotting, vai al vidomy e appendi la carta assorbente. L'immunoassay è un singolo test immunoassorbente legato all'enzima (IPA) davanti alla porzione elettroforetica del virus nel gel e trasferito alla membrana di nitrocellulosa ("blotter"). La procedura di immunoblot viene memorizzata in fasi decile (Fig. 27). L'elettroforesi viene data a una serie di precedenti operazioni di pulizia e macinazione dei componenti di conservazione del VIL; Utilizzando il metodo di blotting (un analogo di un tampone su un tampone di punti neri in eccesso), trasferire gli antigeni dal gel alla nitrocellulosi o al filtro di nylon, poiché è possibile rivelare lo spettro invisibile di BIL dal gel. Dal sulla striscia da applicare al materiale dell'adolescente (syrovatka, plasma sanguigno del paziente, ecc.) E se nel campione є antigeni specifici, la puzza suonerà a causa delle imperfezioni strettamente specifiche degli antigeni. Come risultato di ulteriori manipolazioni (simile IPA), il risultato del processo di interazione deve diventare visibile - essere visibile. Alla fine della giornata, la presenza di smog sulle piastre cantanti della striscia aumenta la presenza di antigeni agli antigeni strettamente cantanti di VIL.

La macchia immunitaria è più spesso viziosa per la diagnosi di infezione da HIV. L'OMS importa anticorpi positivi, in cui il metodo di immunoblotting rivela anticorpi per due parti qualsiasi del guscio VIL. Naturalmente, con le raccomandazioni di cui sopra, se c'è una reazione di uno con uno dei gusci (gp160, gp120, gp41) nello stesso punto, ma senza reazione con le altre bottiglie, il risultato è da riassumere e si consiglia di ripetere l'errore. Per l'assicurazione personale, dove

Piccolo. 27. Per effettuare l'immunoblotting sulla prima fase del test, per vendicarsi nel sangue, aggiungerlo al gel secondo il peso molecolareі carica dietro il campo elettrico ausiliario (con il metodo dell'elettroforesi in gel). Quindi applicare una membrana di nitrocellulosa o nylon sul gel e "macchiare" (tse і blot). È necessario soggiornare in una camera speciale, poiché consente il trasferimento di materiale dal gel alla membrana. Di conseguenza, questa immagine di blotting, come un proiettile su un gel, viene creata su una membrana (blot), che può essere facilmente manipolata. La membrana viene cosparsa di anticorpi contro l'antigene antigenico e quando viene aggiunto il materiale non legato, il coniugato viene inviato radioattivamente, che chiama specificamente gli anticorpi (come nell'IPA). Il concetto di trovare un complesso "antigene-anticorpo - bersagli coniugati" e iniziare con l'aiuto dell'autoradiografia sulla base dei test a raggi X. Se mostri molta intelligenza, hai antigeni nel sangue o se il risultato non è chiaro, si consiglia di essere avvertiti allungando sei mesi (fino a quando non riesci a sentire tre mesi attraverso la pelle).

In una determinata ora nella Federazione Russa, si raccomanda di utilizzare cinque sistemi di test per i test nella diagnosi dell'infezione da VIL, sia russi che stranieri.

3 libri Anestesiologia e Rianimazione l'autore Marina Oleksandrivna Kolesnikova

Libro della divinità del nostro corpo. Anatomia di Tsikava autore Steven Juan

3 del libro Una guida al primo soccorso autore Mikola Berg

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immunoblotting -(In inglese. "Blot" - plyama) - un metodo per identificare antigeni (o antigeni) per ulteriori specie di antigeni (o antigeni). Є Secondo l'elettroforesi su gel dell'IFA. Un certo numero di cellule batteriche può essere testato per ulteriori ultrasuoni e, con il metodo dell'elettroforesi, tutti gli antigeni vengono utilizzati per virus e cellule batteriche e un reagente commerciale può essere ottenuto su uno speciale microcellulare. Quando si effettua l'immunoblotting, il campione di un paziente viene applicato al galleggiante con antigeni visibili. Dopo l'incubazione e la rimozione degli anticorpi non legati, iniziare prima dell'IPA - applicare antisirovanti alla segale fino alle immunoglobuline umane, etichettate con un enzima e un substrato cromogenico, nonché i cambiamenti nella fermentazione durante l'assunzione di un enzima. Con la presenza di complessi antigene-antigene-antisirovat, fino all'immunoglobulina-enzima sul naso, vengono etichettati. Il metodo di immunoblotting consente il rilevamento dell'antigene sull'antigene del virus (ad esempio, in caso di infezione da HIV, immunoblotting dell'anticorpo su gp120, gp24 e altri antigeni del virus).

Analisi radioimmune (RIA)

Il metodo si basa sulla reazione antigene-antigene con antigene antigene o antigene antigene. Nella capacità del mitk sono contenuti 125I, 14C, 3H, 51Cr e altri radionuclidi. Istituzione di complessi immuni dal sistema e dall'inizio della radioattività sui veterinari (β-vyprominuvannya). L'intensità di viprominuvannya è direttamente proporzionale al numero di molecole legate all'antigene e agli anticorpi.

Ampio ampliamento delle varianti in fase solida di PIA con la presenza di diversi antigeni o antigeni adsorbiti nei pozzetti dei pannelli di polistirene.

PIA è utilizzato per la rilevazione di antigeni, microbi, virus, ormoni, enzimi, Lykarskiy rechovin, Le immunoglobuline, così come altre parole, si possono trovare nei materiali pre-giovanili in concentrazioni minori di 10-12-10-15 g/l.

Controlla il cibo

Reazione alla batteriolisi immunitaria: per la reazione; scho є antigene, scho - anticorpi, meccanismo di reazione, metodi di impostazione, pratico succhiare... Reazione all'emolisi immunitaria: informazioni necessarie, modalità di impostazione; kontrolі, pratico zasosuvannya. Reazione dell'emolisi locale nell'elio (reazione di Yerne): il principio della reazione, il metodo di impostazione, è pratico risolverlo. Reazioni che coinvolgono il complemento: il principio di reazione; come alzarsi di fronte all'interazione del sistema immunitario con antigene specifico ; Come puoi vedere il complemento, come puoi essere presente quando sei in contatto? Qual è la quota di complemento nella stessa quantità dell'antigene e degli anticorpi di una spora non specifica? Per l'aiuto di una tale reazione, è possibile fare la differenza, che è diventata un complemento; a quale vikoristovuєtsya la stessa reazione; Qual è il risultato positivo visibile dell'RSK? A cosa? Com'è possibile che il potere del complemento sia vittorioso nella prima fase dell'RSK? Hai un'altra fase? È un risultato positivo o negativo? Spiega i risultati: RSK + + + +, RSK + + +, RSK + +, RSK +. Denominare gli ingredienti del primo sistema dell'RSK e gli ingredienti degli altri sistemi dell'RSK. Perché un sirovatk doslijuvan ha bisogno di un'attivazione? Yak titolato complemento? Sirovatka emolitica: come vendicarsi, come ottenerlo, come nasce il titolo e come inizia? Che tipo di creature vogliono poter portare via i componenti dell'RSK? Tecnica per impostare l'RSC al freddo. Quando si organizzano reazioni travolgenti, è necessario partecipare al complemento: precipitazione, flocculazione, agglutinazione, rilevamento di anticorpi inadeguati, batteriolisi immunitaria, emolisi immunitaria, Yerne, RSC? Reazione di immunofluorescenza (RIF) - per indicare l'ultimo dei passaggi nella reazione diretta di Koons; Ingredienti necessari. Cos'è l'antigene, cosa - anticorpi, anticorpi bassi, come può essere assicurato il risultato della reazione, come si può vedere un risultato positivo? Praticamente stasi: come puoi aiutare per la reazione aggiuntiva? Reazione indiretta di immunofluorescenza - per indicare l'ultimo degli eventi nel corso della reazione, la necessità di un antigene, poiché il sistema immunitario ristagna; zasosuvannya pratico; trasferimento di RIF indiretto in una reazione diretta. Saggio di immunoassorbimento enzimatico (IFA) - il principio della reazione; investimento necessario; indicare l'ultimo dei messaggi quando si mette in scena una reazione con la comparsa di un antigene nel materiale precedentemente riportato; investimento necessario; Come puoi essere visto con un risultato positivo, come vedi? Per indicare l'ultima delle prestazioni durante la messa in scena dell'IPA con la comparsa di anticorpi nei preliminari; investimento necessario; come essere visti con un risultato positivo? Immunoblotting: il principio di reazione; passaggi di base; investimento necessario; come vincere il risultato; reazione perevagi. Analisi radioimmune (RIA) - le fasi fondamentali della reazione; valori bassi di antigeni o antigeni, come si può assicurare il risultato? Microscopia immunoelettronica: un principio per un metodo; passaggi di base; investimento necessario; anticorpi inferiori; come assicurare il risultato della reazione. Reazioni di immobilizzazione - il principio del metodo, la tecnica di impostazione, i componenti, i risultati.

Zavdannya per vikonannya nel processo di auto-preparazione.

Conservare la tabella "Reazioni all'immunità" relativa alle reazioni, da selezionare nell'ambito di quelle date.

reazioni all'immunità

Il robot di uno studente nell'impiego pratico

Al robot, parti immediatamente dall'impostazione della 1a fase dell'RSK e scrivi anche il messaggio (div. Nizche).

1. Reazione dell'emolisi immunitaria. Lasciati stupire dalla dimostrazione della reazione all'emolisi immunitaria, compila lo schema, spiega il risultato nei precedenti e nelle provette di controllo.

2. Reazione dell'anello del complemento

a) selezionare RSK secondo le tabelle;

b) nakresliti in zoshit lo schema di impostazione dell'RSK ai tavoli viglyadі;

c) mettere un'altra fase dell'RSC (la prima fase si mette all'orecchio dell'occupato);

d) farmaci diagnostici rozіbrati, necessari per RSK;

e) risultato vrahuvati. Formulare visnovok sulla manifestazione di anticorpi specifici nei preliminari.

3. Reazione di immunofluorescenza. Crea un tavolo, memorizza uno schema per mettere in scena una reazione; meravigliarsi della diagnostica; viznachte - come vendicarsi della sirovatka, yak preparato, per la quale la reazione (RIF diretta o indiretta) non si bloccherà. Lasciati stupire dal risultato dimostrativo del RIF in un microscopio luminescente.

4. Analisi immunologica (IPA). Memorizzare lo schema per l'impostazione della reazione in due versioni: per rilevare l'antigene nei materiali pre-senzienti e per rilevare l'antigene negli syrovati. Familiarizza con il set di Ingredienti per la diagnosi dell'infezione da HIV e dell'epatite B.

5. Immunoblotting. Inserisci lo schema di cucitura per mettere in scena la reazione; meravigliarsi della dimostrazione è il risultato della reazione.

6. Analisi radioimmune (RIA). Mettilo nello schema della reazione.

7. Microscopia elettronica immunitaria (IEM). Essere stupiti dalla dimostrazione è il risultato della reazione, creare lo schema della reazione, utilizzare l'antigene (virus) e l'antigene bersaglio con l'aiuto delle frecce.

L'immunoblotting è un metodo altamente sensibile per rilevare le macchie, archiviare per la seconda elettroforesi e IFA o PIA. L'immunoblotting è un metodo diagnostico per l'infezione e l'infezione da HIV.

In un senso zelante di immunoblotting, l'analisi di somme di tessuti, trasferiti su una membrana di rivestimento solida, è collegata a legami covalenti, con un'ulteriore immunorilevazione.

L'analisi può essere riassunta, senza applicare a priori al tampone, - analisi dot-blot - mediante elettrofocalizzazione, elettroforesi su disco o elettroforesi occidentale a doppia faccia - analisi occidentale

Gli antigeni del patogeno vengono utilizzati per l'elettroforesi aggiuntiva in gel di poliacrilammide, quindi vengono trasferiti dal gel al tessuto attivo o alla membrana di nitrocellulosa e compaiono dietro l'IPA ausiliario.

Vipuskayut fermo come compiaciuti con una "macchia" di antigeni. Applicare syrovat di una persona malata a una donna . Quindi, durante l'incubazione, sono in grado di identificare come anticorpi non correlati dei malati e di applicare syrovat contro l'immunoglobulina nell'uomo, marcato con un enzima . Dopo essersi stabilizzato su un complesso levigato (antigene + antimalato + anti-Ig umano), all'enzima viene aggiunto un substrato cromogenico.

Questa metodologia è utilizzata anche per la selezione di cloni di batteri, fagi o virus e per esprimere i prodotti di interi geni clonati.

Il trasferimento delle batterie alla membrana funzionerà o passivamente, oppure il dispositivo per il trasferimento elettrico. Per l'efficienza del trasferimento dei bin alla membrana, iniettando fattori liberi, come peso molecolare dei bin, porosità del gel, ora di trasferimento e conservazione della soluzione tampone viziosa (trans-buffer).

È sempre una questione di conoscenze e di menti che l'esperimento venga svolto per adeguarsi e riprogrammare, in modo da non preservare i migliori risultati. Nella capacità del rivestimento, si sviluppa la cattiveria delle membrane di nylon nitrocellulosiche, polivinilidendifluoridate (PVDF) o caricate positivamente. La nitrocelulosa può essere applicata fino a 80 - 100 μg di una bottiglia per 1 cm2.

Le proteine ​​a basso peso molecolare (con un peso molecolare inferiore a 20 kDa) possono essere rovinate a causa del lavaggio, ed esiste la possibilità in anticipo del potenziale polimorfismo dei loci genetici cantanti in base all'aumento di frammenti di restrizione specifici di DNA.

Inoltre, per l'ibridazione aggiuntiva secondo Southern, è possibile determinare facilmente quale gene viene utilizzato per idrolizzare l'endonucleasi di restrizione del canto nella sua parte interna, consentendo alla regione di selezionare la strategia ottimale per realizzare il processo di clonazione.

Per uno schema analogo, le molecole di RNA possono essere trasferite dal gel di agarosio al filtro di nitrocellulosa. L'intero metodo di blotting dei nomi è il Northern blotting contro il Southern blotting, così come il Southern blotting. inglese significa "pivdenny".

Il trasferimento su un filtro con un gel era apparentemente chiamato Western blotting. Grandi proteine ​​(oltre 100 kDa), denaturate sotto forma di sodio dodecil solfato (SDS), possono essere scarsamente trasferite alla membrana, anche in trans-buffer in presenza di etanolo. L'alcol tingerà in modo significativo il trasferimento di bottiglie dal gel di poliacrilammide SDS, ale il suono dei pori nel gel, in modo che possa essere prodotto fino a coprire le grandi bottiglie.

La membrana PVDF è ottimizzata per l'immunorilevazione e l'alto livello di specificità fino a 160 μg/cm2 a un livello anche basso di livello non specifico.

immunoblotting

Il potere dell'intera membrana è più importante: il potere del bagatoraz vicorystannya. Le membrane in nylon Zeta-Probe legano efficacemente le bottiglie SDS per un'ora quando si consuma alcol. Anche le proteine ​​a basso peso molecolare possono essere ridotte in modo efficiente. I miscelatori ad alta energia sono vicini a 480 μg di bottiglia per 1 cm2 - le membrane Zeta-Probe consentono la comparsa di diverse quantità di bottiglie nelle somme analizzate.

Affinché l'antigene appaia "mobilitato" sulla membrana, è troppo tardi per bloccare la gelatina, o flagellare l'albume o il latte grasso.

Quindi la membrana viene incubata nella gamma di anticorpi policlonali o monoclonali fino a raggiungere l'antigene. Per la formazione di anticorpi non legati, la membrana viene incubata sotto forma di anticorpi secondari, che sono un coniugato di enzimi di fosfatasi alcalina (AR) o perossidasi chronu (perossidasi di rafano, HRP) contro gli anticorpi ) o blocco A (blocco Staphylococcus aureus) o G (blocco Streptococcus sp.), che può avere un'elevata affinità con la regione Fc delle immunoglobuline.

Il rilevamento di complessi immunitari stabiliti viene effettuato in modo chimico o chemiluminescente. substrati per reazioni chimiche nel caso dei coniugati vicorian della fosfatasi idrata si usa il 5-bromo-4-cloro-3-indolil fosfato (BCIP) o il tetrazolio blacitnium (NBT), e nei coniugati vicorian della perossidasi chronu - 4-cloro-1-acqua -naftolo ta.

Come risultato delle reazioni enzimatiche sulla membrana, il fumo si trova in uno stato di localizzazione al complesso antigene-antigene.

La sensibilità del metodo d'immagazzinamento dato al metodo è 100 pg di una bottiglia con vikorystanny coniuga AR e 100-500 pg quando vikorystanny coniuga HRP. La rilevazione chemiluminescente degli immunocomplessi consente all'antigene di essere inferiore a 5 pg. Il principio del metodo di polarizzazione è che, nella reazione di HRP con acqua ossigenata e azione ciclica, l'emissione di luce è applicata al gin di 428 nm, che può essere fissato alla luce.

La reazione di immunoblotting (PI) viene scomposta sulla base dell'IFA. con il metodo più specifico e sensibile di analisi immunochimica. Immunoblotting (in inglese Blot - blotting, plyama) di un IPA con elettroforesi. Dovrebbe essere utilizzato per la rilevazione di anticorpi NON complessi contro VIL, ma anticorpi contro proteine ​​strutturali estreme (bilky-p24, glicoproteina-gp120, gp 41 e in.). Da riferire alle reazioni esperte (verificabili) della diagnosi di infezione da VIL.

La reazione viene condotta nel numero di stadi:

Test del virus sui componenti - antigeni (p24, gp120, gp 41 e in.), Quando l'elettroforesi viene eseguita in gel di poliacrilammide, in modo che gli antigeni si trovino sulla frazione in base al peso molecolare.

2. Il gel è ricoperto da una membrana nitrocellulosica e le frazioni di antigeni vengono trasferite su di esso per un'ulteriore elettroforesi. La nitrocelulosio è simile alla carta assorbente. La membrana è progettata per le macchie (strisce). Vipuskayut fermo come compiaciuti con una "macchia" di antigeni.

Immunoblotting - un metodo indiretto di pre-trattamento

Le strisce con antigeni VIL applicati su di esse vengono rivestite con materiali non collegati e quindi aggiunti a materiali non correlati.

4. Le strisce vengono incubate con antiglobulina syrovatum, marcate con perossidasi e aggiustate.

Aggiungere un substrato e indicare il numero di frazioni indurite (spiagge) che compaiono nella zona di localizzazione del complesso AG-AT.

La presenza di smog nei giorni di canto della striscia conferma la presenza di antigeni verso antigeni VIL strettamente cantanti in antigeni preesistenti. Il risultato dell'immunoblotting è positivo, anche se le membrane mostrano giuramenti, che sono due dei tre antigeni ILL: p24, gp41 e gp 120 (piccolo 37).

MALUNKI

Elenco dei vikoristanikh dzherel

Letteratura di base

Microbiologia medica, virologia e immunologia: un gestore per studenti di medicina. università 2a ed., rev. aggiungo. - 702 pag. Pid ed. AA. Vorobyova. Mosca: , 2012.

2. Microbiologia, Virologia e Immunologia: è essenziale portare prima del laboratorio: Libro di testo / (VB Sboychakov і ін.); ed ed. V.B.Sboychakova, M.M. Karapats. - M.: GEOTAR-Media, 2014.- 320 p.: Ill.

3. Microbiologia medica, immunologia e virologia [Risorsa elettronica]: gestore del miele.

università - 760 p. - Modalità di accesso: http://www.studmedlib.ru/book/ISBN9785299004250.html Korotyaev A.I., Babichev S.A. SPb.: Spetslit 2010.

4. Microbiologia medica, virologia e immunologia [Risorsa elettronica]: gestore: 2 vol. / T. 1. - 448 p. - Modalità di accesso: http://www.studmedlib.ru/book/ISBN97859704142241.html Zvєrєv V.V., Boychenko M.N.

M.: GEOTAR Media, 2010 ..

5. Microbiologia medica, virologia e immunologia [Risorsa elettronica]: responsabile: 2 Vol. T. 2. - 480 p. Modalità di accesso: http://www.studmedlib.ru/book/ISBN97859704142242.html Zvєrєv V.V., Boychenko M.N. M.: GEOTAR Media, 2010 rock.

Letteratura Dodatkova

1.Reazioni immunodiagnostiche: libro iniziale / ordine: G.K.Davletshina, Z.G. Gabidullin, A.A. Akhtarieva, M.M. Tuigunov, A.K. Bulgakov, T.A. Savchenko, R.f. ...

Khusnarizanova, Yu.Z. Gabidullin, M.M. Alsinbaev - Ufa: Casa editrice dell'Istituto statale di istruzione di bilancio per l'istruzione professionale superiore BDMU Ministero della salute della Russia, 2016. - 86p.

2. Le peculiarità dei poteri che sono, che causano il potenziale patogeno delle varietà co-coltivate di batteri Enterobacter, Citrobacter, Serratia, E. coli, Proteus: visione scientifica / Yu. Z. Gabidullin, R.S. Sufiyarov, I. . Dolgushin - Ufa, 2015 .-- 250 p.

INIZIO »Immunoblot - bene? Immunoblot nella diagnostica delle malattie infettive

Immunoblot - bene? Immunoblot nella diagnostica delle malattie infettive

Quindi anche immunoblot? Metodo delle estensioni diagnostica di laboratorio Malattie infettive delle persone. Win è uno dei modi più accurati e superiori per rivelare la visibilità del VIL.

Per affidabilità, è meglio trovare maggiori informazioni, abbassare il dosaggio enzimatico sull'immunosorbente (elisa). I risultati dell'immunoblot saranno irrevocabili e definitivi.

Immunoblot - bene? Per dirlo a Ludin VIL, devi andare metodo di laboratorio monitoraggio dell'emocromo per la presenza di anticorpi.

Il metodo del Western blot è anche chiamato Western blot (Western blot). Vinci vikorystovuyutsya per l'individuazione di persone infettive straniere, in qualità di metodo esperto pre-laurea. Il prezzo è necessario per la conferma dell'IFA - monitoraggio di laboratorio, che consente la presenza di anticorpi VIL nel sangue. Immunoblot converte l'IFA positivo.

Vinci vvazhaєtsya più sensibile, pieghevole e costoso.

meta

Quindi anche immunoblot? tecnica qia dosaggi di laboratorio emocromo per la presenza di anticorpi contro il virus.

Nel corso di speciali sfoghi illeciti nel gel e sulla membrana nitrocellulosica.

Immunoblotting (rilevamento di antigeni in syvates di disturbi prima di cantare antigeni di un disturbo)

Applica la procedura delle sezioni di Western blotting per la definizione di infezione da VIL nelle fasi iniziali. Nella prima fase, le purificazioni dei virus dalle parti di stoccaggio sono date dall'elettroforesi e dagli antigeni, che possono entrare prima di esso, alimentati al vagu molecolare.

Il virus dell'immunodeficienza delle persone si moltiplica nelle cellule viventi, nelle sue informazioni genetiche. Nella fase ts_y, lyudin cresce fino al virus VIL, così come le informazioni vi buli.

La specificità della malattia di un polyagi è che non compare nell'ultima ora. I linfociti del virus ruinu, in tale grado, nell'uomo, l'immunità e l'organismo sono ridotti e diventano immaturi alle prese con le infezioni.

Yaksho VIL-tse ha ragione e giustamente likuvati, il paziente vivrà fino alla vecchiaia. La visibilità della malattia sarà inevitabilmente portata alla morte. Al momento dell'infezione, birra senza lіkuvannya, termine massimo non più di dieci rocce.

Caratteristiche

L'analisi dell'immunoblotting è un metodo superiore, che consente la presenza di anticorpi contro gli antigeni VIL del primo e dell'altro tipo.

Come è stato informato Lyudin, ha scritto due tipi di anticorpi, poiché possono essere trovati in modo significativo. Soprattutto VIL sono quelli che hanno molti anticorpi che crescono rapidamente e si perdono nel sangue del paziente. Porta l'odore della presenza, il disturbo potrebbe non apparire in un tratto di due o più rocce. Il metodo IPA non dipende esattamente dalla presenza di disturbi, ma sulla base della conferma dei risultati sotto forma di PLR e Western blotting, nonché dell'analisi immunoenzimatica che mostra un risultato positivo.

mostrando prima

Bene, per "immunoblot" già z'yasuvali, o addirittura introdurlo nel dos?

L'impulso fino alla conversione all'immunoblot del virus dell'immunodeficienza umana (VIL) diventa un risultato positivo dell'IFA. È necessario passare attraverso un saggio di immunoassorbimento enzimatico in fase solida nei disturbi, al fine di eseguire un'operazione. Inoltre, per colpa dell'analisi, il vaginismo delle donne è pianificato, ed è anche silenzioso, stato di vita... Western blot viene distribuito ai pazienti con infezione da VIL, se i risultati sono riassunti.

La spinta al potenziamento del farmaco può essere causata dall'insorgenza di sintomi fastidiosi: shvidka vrata vrata, debolezza, vrata funktsii, dislocazione intestinale (cadente), yak trivaє tre vigore; febbre; donna febbrile; miglioramento delle università linfatiche nell'organismo; sviluppo di candidosi, tubercolosi, polmonite, toxoplasmosi, herpes acuto.

Il paziente non ha bisogno di prepararsi prima di somministrare il sangue venoso.

Per 8-10 anni prima i test non esistono. Non è consigliabile vivere alcol e bevande alcoliche il giorno prima della somministrazione del sangue, importanti diritti fisici, per essere consapevoli di hvilyuvannya.

Analisi del robit?

Posso fare un test su VIL?

L'IFA, analisi immunoblot, effettuata nelle cliniche private locali, dà i risultati durante tutta la giornata. Può terminnova la diagnostica. Per le grandi installazioni, i test medici, le sezioni elisa e Western blot sono gratuiti, secondo la legislazione della Federazione Russa.

Obov'yazkov a Malattie infettive donne vaginali e disturbi, che richiedono il ricovero in ospedale o un intervento chirurgico.

Yak per tenere un IFA? Immunoblot positivo/negativo conferma o semplicemente risulta da elisa. La procedura è semplice da completare. Specialista zdіysnyu raccolta di sangue venoso, per un'ora il prezzo del prestito inferiore a cinque khvili.

Selezionare un campione, quindi disinfettarlo e sigillarlo con gesso. Il prelievo viene effettuato sul cuore, per via del procedimento, non piantare una tavoletta di cioccolata calda o un liquore caldo.

Se si desidera correggere la direzione per un'analisi senza graffette nell'istituto medico statale, è necessario consultare un terapeuta.

In generale, l'immunoblot non attraversa la recinzione. La metodologia di dosaggio è semplice. Anche nel sangue delle persone, la presenza di un virus, organismo per la loro dignità, è l'inizio dell'antivirus. Per il virus della pelle senza antigeni proteici. Il rilevamento degli anticorpi cich si basa sul metodo Western blot. collaborazione

Quante analisi? Immunoblot VIL è usato a prezzi economici.

Nel mezzo, i metodi di screening dell'immunoanalisi passano da 500 a 900 rubli. Western blot di distribuzioni il numero di cambiamenti, il cui numero varia da tre a cinque redditi minimi non rimborsabili della comunità. Più metodi di piegatura sono più costosi. Ad esempio, per l'analisi della reazione della lancia della polimerasi (PLR), dovrai pagare quasi 12.000 rubli.

Interpretazione dei risultati

I metodi più avanzati di diagnostica dell'infezione da HIV analisi immunoenzimatica e immunoblot.

Odore di viznachennya negli anticorpi sirovattsi per le persone con immunodeficienza virale. L'infettività chiede di confermare due test: screening e conferma. L'interpretazione dei risultati è colpevole effettuata dal medico, nella diagnosi e indicativa della malattia. Yaksho immunoblot è positivo, il che significa che è un virus nel corpo umano.

Un risultato positivo non è da biasimare per diventare una spinta all'autoindulgenza, i frammenti di un paziente con la pelle possono creare la propria immagine di una persona malata.

L'analisi Yakisny include lo screening e la certificazione. Non appena il paziente non ha un virus, il risultato viene mostrato "negativamente". Se è stato rilasciato un certificato, lo screening dovrebbe essere effettuato in anticipo. Analisi immunoblot, che è supportata o semplice screening. Inoltre, i test-compiaciuti si trovano nelle aree di oscuramento (localizzazione della bile), l'impostazione della diagnosi "VIL".

Non appena i risultati sono riassunti, la viprobazione viene eseguita allungando tre mesi.

Se le persone sono infettate dal virus, possono avere deficienze immunitarie se seguono le regole: tipi unici di contatti, preservativi per procura a contatto, non prendo droghe.

Non appena la donna si è ammalata, è importante seguire le raccomandazioni del medico, non dimenticare il test per il virus.

Che ne dici di una macchia occidentale?

Identificazione della biblioteca in somme complesse o estratti di piccoli tessuti - una delle fabbriche più popolari. Vikoristovuchi uno strumento come un anticorpo specifico, è possibile aumentare il numero di blocchi con un minimo di tempo e vitrati finanziari.

Nel metodo Western blotting, nella prima fase, la quantità di bottiglie viene distribuita con il metodo dell'elettroforesi in presenza di sodio dodecil solfato (SDS), quindi trasferita alla membrana di nitrocellulosa con il metodo dell'elettroblotting.

L'essenza del metodo dato al metodo è che il gel per l'elettroforesi è posto sulla membrana di nitrocellulosa tra le sfere della carta da filtro. Selezionato da tale rango "sandwich" viene posto in un campo elettrico in modo che i complessi blocco-SDS collassino attraverso la piastra al gel e si mobilitino (a causa dell'assorbimento non specifico) sulla superficie della membrana nitrocellulosica.

Al complesso blocco-SDS con membrana nitrocellulosica, partecipa al potere principale di natura elettrica, inoltre, l'interazione è data da multipunto e per "spalmare" i blocchi sulla superficie della membrana. In tale grado, posso accettare una replica di un gel su una nitrocellulosa mediante elettrotrasferimento di un gel con bottiglie, che sono arrostite allo stesso modo di un gel di poliacrilammide.

Per eseguire SDS - elettroforesi, trasferimento elettrico e assorbimento di proteine ​​dal gel alla membrana di nitrocellulosa, la conformazione tretina della proteina è stata notevolmente modificata, come se fosse corretto parlare della formazione della terza struttura per la formazione di la terza struttura. Pertanto, per la rilevazione immunochimica di una proteina pre-giovanile, lasciamo che sviluppi solo anticorpi mono o policlonali, specifici per i dilenks di linina di una molecola proteica.

51. Analisi immunologica, immunoblotting. Khutra-nizm, componenti, zasosuvannya.

Gli anticorpi specifici per la conformità dei test (ad esempio, compresi i contatti intersub'edinich), di regola, non sono adatti per vittoriosi nel metodo Western blot.

Dopo aver trasferito la proteina alla membrana, incubare uno dopo l'altro con anticorpi, specifici per l'ultimo bit, e poi con secondi anticorpi, specifici per frammenti Fc degli anticorpi primari, coniugati dall'enzima (comunque).

1A). A volte, se c'è una coniugazione lieve senza un primario medio, specifico per l'antigene dell'antigene, l'antigene secondario non è richiesto (Fig. 1 B). Stabilito nella localizzazione della cellula pre-lente dell'immunocomplesso, il complesso "si manifesta" dietro un ulteriore substrato cromogenico (a trovarsi sotto forma di acaro).

La sensibilità e la specificità del metodo sono fortemente influenzate dal fatto che durante le fasi preliminari si osserva l'antimanomissione.

Gli anticorpi vittoriosi sono colpevoli di essere specifici per unici, caratteristici solo per la scala pre-giovanile dell'ultimo degli amminoacidi. In generale esiste la possibilità di interazione (soprattutto nei tempi degli estratti bianchi grossolani) di anticorpi da decalcoma con molecole proteiche, che a loro volta vengono prodotte prima che gli smog decalcificati compaiano sulle membrane.

L'identificazione di una bottiglia pre-giovanile in questo modo è spesso imbarazzante o odiosa.

Un altro fattore importante, su che tipo di memoria in caso di selezione antibiotica, є affinità. Chim vishche affinitet vikorystovuvanih anti-l, thym yaskravish e chitkish per più lontano bilkovy smog, tim più sensibilità al metodo. Con gli anticorpi viziosi ad alta affinità, puoi raggiungere una sensibilità di 1 ng e bere di più.

Per la visualizzazione del risultato dell'interazione dell'antigene legato alla membrana e l'antigene e gli anticorpi secondari, coniugati con gli agenti, che vengono inviati nelle menti cantanti, danno un segnale.

Nome nel ruolo di tale agente un enzima vizioso (perossidasi o fosfatasi), il prodotto della reazione di una bassa pressione e vipaday sulle membrane di un assedio intatto.

anche in questo metodo Sono disponibili più guanti fluorescenti.

Piccolo. 1. Schema dell'allevamento immunochimico di una bottiglia pre-lenta: A - per gli anticorpi secondari, coniugati con l'enzima mitkoy; B - anticorpi primari senza coniugazione pre-mediata con mitkoy enzimatico.

protocollo:

I. Preparazione del gel e della membrana e trasferimento elettrico dei contenitori

Per l'elettroforesi, il gel di poliacrilammide viene posto in un bagno con tampone blotting (25 mM Tris, pH 8,3, 192 mM glucina, 10% etanolo).

Due fogli di carta da filtro, avvolti a forma di cassetta assorbente e imbevuti di tampone assorbente, vengono posti sulla parte della cassetta che verrà spazzolata all'anodo. Quindi, sulla carta da filtro, metti la membrana di nitrocellulosa, che è stata imbevuta dello stesso tampone, davanti ad essa, cuce dietro di essa e non ci sono bulbi tra la membrana e la carta.

Quando si scrive sulla membrana, applicare delicatamente il gel, rispettando ancora una volta l'aspetto dei bulbi quando si sfrega tra il gel e la membrana. Finire il sandwich con due palline con carta da filtro imbevuta, che vengono posizionate sulla superficie del gel (Fig. 2). I sandwich Otrimany vengono infilati nella cassetta e posizionati tra gli elettrodi in modo che la membrana del proiettile venga rivolta verso l'anodo.

Piccolo. 2. Schema del trasferimento elettrico dei tessuti alla membrana.

II. trasferimento elettrico

L'elettrotrasferimento delle fibre alla membrana di nitrocellulosa deve essere effettuato in tampone con Tris 25 mM, pH 8,3, glicina 192 mM, etanolo 10% con un allungamento di 30-50 min a pressione continua di 100 V.

Un'ora affinché il trasferimento elettrico si trovi nella dimensione del trasferimento da trasferire in generale, nіzh più bello, Tim sta meglio con il trasferimento elettrico. Viene valutata la forza del trasferimento elettrico e la crescita di smog bianco, la membrana di nitrocellulosa viene rivestita con una soluzione allo 0,3% di Ponceau S in acido alcalino all'1%. Prima di eseguire l'allevamento immunochimico, la membrana deve essere leggermente assottigliata. disputa sull'acqua Tris per vidalennya zv'yazavsya con barvnik bar.

III. Allevamenti immunochimici di tessuti, immobilizzati su membrane nitrocellulosiche

Per il blocco di anticorpi non specifici, la membrana viene incubata a miscelazione costante a temperatura ambiente per 30 minuti in PBST (per un breve blocco del latte è possibile ridurre la quantità di PBST secco, non è necessario utilizzare il 10%).

Per il blocco, la membrana è stata incubata a lungo a temperatura ambiente e mescolata continuamente in PBST, quindi sono stati rimossi 1-10 μg/ml di anticorpi specifici.

La concentrazione ottimale di anticorpi è selezionata empiricamente e si basa sull'affinità della relazione tra antigene e antigene.

Al termine dell'incubazione, la membrana di promessa è 5 volte PBST e gli anticorpi secondari coniugati con perossidasi crono vengono trasferiti al mercato. L'allevamento del coniugato è incoraggiato a prendere un virobnik sulla confezione o ad essere selezionato empiricamente. Nel caso di anticorpi secondari, la membrana incubuvati ha 1 anno con miscelazione continua.

Trasferire la membrana PBST su un substrato cromogenico, 3 mg di diaminobenzidina (DAB) e 10 μl di perossido acquoso al 30% in 10 ml di Tris-HCl 0,1 M, pH 7,6

Condurre l'incubazione quando si mescolano 5 - 10 peperoncini. La membrana viene terminata l'incubazione con il substrato, seguita da PBST, asciutta, asciugata con carta da filtro e immediatamente scarabocchiata in una copia elettronica, scansionata a colori. Man mano che la membrana si solleva, il buio tinto giura sfarfallio e l'immagine appare meno luminosa e contrastante.

Nota: DAB è un discorso tossico e un potenziale cancerogeno. Pratsyuvati tilki in guanti di gomma!

L'immunoblotting (immunoblotting) è un metodo di riferimento altamente specifico e altamente sensibile, che è una diagnostica di conferma per i pazienti con risultati positivi o non importanti delle analisi, inclusi con l'aiuto di RPGA o IFA .

L'intero metodo di rilevamento degli antigeni a determinati antigeni dell'originatore sull'impostazione dell'IPA sulle membrane di nitrocellulosa, su quelle vicino agli occhi dei compiaciuti scuri, vengono applicate etichette specifiche, rotte dall'elettroforesi su gel. Anche є anticorpi di antigeni opposti - c'è una linea scura nel luogo comune della striscia. L'unicità dell'immunoblot del campo nei più alti risultati informativi e affidabili.

Materiale per doslіgennyaє sirovatka abo plasma sanguigno di persone. Per continuare su una striscia, sono necessari 1,5-2 ml di sangue o 15-25 μl di sangue.

Affinché la raccomandazione del VOOZ Immunoblotting (Western Blot) sia vittoriosa nella diagnosi di infezione da VIL in qualità di un metodo esperto aggiuntivo, colpevole di confermare i risultati dell'IFA. Considera l'utilizzo del metodo di conversione di un risultato positivo in IPA, se sei più sensibile e specifico, se vuoi che sia più flessibile e costoso.

L'immunoassay è un singolo test di immunoassorbimento enzimatico (IPA) davanti alla base elettroforetica del virus nel gel e trasferito alla membrana di nitrocellulosa. La procedura di immunoblot viene memorizzata in fasi di decile. L'elettroforesi viene data a una serie di precedenti operazioni di pulizia e macinazione dei componenti di conservazione del VIL; Usando il metodo di blotting, gli antigeni vengono trasferiti dal gel a un piccolo filtro di nylon o filtro di nylon, in modo che lo spettro invisibile delle proteine, caratteristico di VIL, sia invisibile. Dal sulla striscia da applicare con materiale aggiuntivo (syrovatka, plasma sanguigno del paziente, ecc.) E anche se nel campione є antigeni specifici, la puzza suona a causa degli antigeni tetri strettamente correlati. Come risultato di ulteriori manipolazioni (simile IPA), il risultato del processo di interazione deve diventare visibile - essere visibile. La presenza di smog nei giorni di canto della striscia conferma la presenza di antigeni verso antigeni VIL strettamente cantanti in antigeni preesistenti.

La macchia immunitaria è più spesso viziosa per la diagnosi di infezione da HIV. L'OMS importa anticorpi positivi, in cui il metodo di immunoblotting rivela anticorpi per due parti qualsiasi del guscio VIL. È ovvio con queste raccomandazioni, se c'è una reazione di uno con uno dei gusci (gp160, gp120, gp41) in primo luogo, ma senza una reazione con le altre bottiglie, il risultato è da riassumere ed è consigliato di ripetere Non appena il risultato sarà visibile, il risultato sarà riassunto, fino a quando non durerà attraverso la pelle per 3 mesi.

Caratteristiche

L'analisi immunoblot è un metodo affidabile che consente la presenza di antigeni ad antigeni del primo e dell'altro tipo. Non appena Lyudin viene informato, anche dopo due mesi ci saranno anticorpi, che potrebbero apparire e in arrivo. La particolarità di VIL è che il numero di anticorpi cresce rapidamente e si trova nel sangue di una persona malata. Porta l'odore della presenza, il disturbo potrebbe non mostrarsi con un tratto di due o più rocce. Il metodo IPA non dipende precisamente dalla manifestazione della malattia, richiede la conferma dei risultati per ulteriori immunoblotting e PLR, nonché un test di immunoassorbimento enzimatico che mostri un risultato positivo.

Mostrato prima del riconoscimento

Scho tse prende "immunoblot" già z'yasuvali, ma a chi riconoscere dane doslіdzhennya? Un risultato IFA positivo è stato ottenuto mediante un'analisi del virus dell'immunodeficienza umana (VIL) mediante il metodo dell'immunoblotting. È necessario passare attraverso un'analisi di immunoassorbimento enzimatico ai pazienti, poiché saranno operativi. Krym, vai all'analisi delle donne, che hanno intenzione di rimanere, così come di tutto, che non è felice della vita. Intendo l'immunoblotting ai pazienti con VIL, così come i risultati dell'IFA.

L'impulso per il pestaggio fino al farmaco può essere causato dai seguenti sintomi allarmanti:

  • rіzke skudnennya;
  • debolezza, perdita di originalità;
  • lussazione intestinale (diarrea), yake trivaє che si estende tre volte;
  • znevodnennya organizmu;
  • donna febbrile;
  • miglioramento delle università linfatiche nei locali;
  • sviluppo di candidosi, tubercolosi, polmonite, toxoplasmosi, herpes acuto.

Il paziente non ha bisogno di prepararsi prima di somministrare il sangue venoso. Per 8-10 anni prima della fine della giornata, non è possibile accettare un bambino. Non è raccomandato dare alcol e bere alla vita per donare il sangue, prendersi cura di importanti diritti fisici, in vista del bisogno di salute.

Quanto tempo ci vorrà?

Dal punto di vista del paziente, l'immunoblot non sembra essere visto da nessun tipo di analisi: si prende il tetto venoso, e si ottiene il risultato. Se entri in alcuni rapporti, il metodo è ancora più difficile, ma proverai di nuovo.

Con l'aiuto della pianta reagente virobnik, il virus "standard" viene portato all'immunodeficienza delle persone. Quindi, per un'ulteriore procedura speciale (elettroforesi) nel mezzo di gel, i virus corrono fino ai successivi magazzini trovati: bilk (antigeni del virus). Per l'aiuto del blotting stesso (in inglese. Blotting), le parti hanno il loro ordinato su materiale speciale - nitrocellulosi o filtro in nylon, vai pronto fino all'indicatore, quindi il titolo della striscia. Stripe è un fumo, sotto forma di antigeni della crescita a maggese del suo peso molecolare, in un chiaro effetto collaterale, in modo che il millimetro di pelle della carta vedrà una cellula cantante.

Se, forse, sai che nel sangue delle persone c'è una presenza di un virus, allora l'organismo inizia a virobare contro le guaine (sfere cantanti) dell'anticorpo, e per il virus della pelle c'è un certo insieme di anticorpi antigenici . La rilevazione di anticorpi contro gli antigeni del sangue nel sangue è alla base del metodo immunoblot. Anche se l'antigene si attacca all'antigene, la puzza non si collegherà inequivocabilmente a uno con uno - "bastone".

Quindi l'asse, gli antigeni si trovano sullo strip-maschio e nel caso della presenza nel sangue degli antigeni preesistenti, il fetore è ovviamente collegato uno ad uno, ma nell'insieme miscellaneo, sullo strip per il test, apparirà l'indicatore (apparirà) Inoltre, in un topo specifico di una donna, in un tale grado, ci sono molti proiettili nel sangue che sono caratteristici di quel virus.

Quindi, ad esempio, quando c'è un oscuramento sul buio nella localizzazione dei mattoni gp160, gp120, gp41 Diagnostica VIL, per quei virus ci sarà una nuova serie di mattoncini.

È necessario assicurarsi che l'immunoblot ti permetta di identificare con precisione la presenza di un virus solo allo stesso modo, se c'è un accumulo di anticorpi nel sangue, quindi se gp160, gp120, gp41 sono presenti al 100% una volta. E l'asse, se vuoi essere uno, non è, ad esempio: gp41 è il giorno e solo gp160, gp120, quindi il test viene visualizzato come riepiloghi e ripetizioni.

parti di cibo

Quali fasi includono immunoblot?

  1. Preparazione della striscia. Prima della pulizia e dello sfregamento sui componenti di conservazione dell'immunodeficienza virale (VIL), viene somministrata l'elettroforesi, quando si entra nel deposito VIL gli antigeni vengono distribuiti secondo il vaso molecolare. Usando il metodo blotting (analogo a un blotter su un blotter di punti neri in eccesso), trasferire gli antigeni alla nitrocellulosi, per vendicarsi dello spettro invisibile dei cigni antigenici caratteristico di VIL.
  2. Doslіdzhennya probi. Sulla macchia di nitrocellulosa viene applicato materiale aggiuntivo (syrovatka, plasma del sangue del paziente, ecc.) E se nel test è presente un anticorpo specifico, la puzza suonerà a causa di anticorpi (complementari) strettamente correlati all'antigene. Come risultato di ulteriori manipolazioni, il risultato del processo di interazione deve diventare visibile - essere visibile.
  3. Trattare il risultato. La presenza di smog nei dilyankas cantanti della piastra antitrocellulosica supporta la presenza negli antigeni preesistenti agli antigeni strettamente cantanti VIL.
  • Smuzhka A - Controllo positivo
  • Smuzhka B - Controllo debolmente positivo
  • Smuzhka S - Controllo negativo
  • Smuzhka D - Pupilla positiva (viene rivelata la presenza di anticorpi contro VIL-1)

Analisi di decifrazione di Yak?

Se l'IFA ha mostrato la presenza di tutti o anche di tutti gli antigeni degli antigeni di determinati sistemi di test, ciò significa analisi positiva su VIL. Ogni volta che un altro test sierologico di immunoassorbimento enzimatico è positivo, è necessario condurre un immunoblot. La decodifica dei risultati sarà maggiore. Se l'analisi immunoassorbente legata all'enzima ha dato un risultato positivo, l'inizio dell'analisi immunoblot, dopo aver mostrato la manifestazione del VIL stesso, il risultato è concluso.

Se l'analisi è decifrata, è richiesta la nobiltà, test positivo inizia dal VIL:

  • dal 60% al 65% dopo 28 giorni dall'infezione;
  • 80% - dopo 42 giorni;
  • nel 90% - dopo 56 giorni;
  • 95% - dopo 84 giorni.

Se viene riconosciuto come positivo su VIL, significa che appare l'antivirus. Per scoprire un falso positivo, è necessario rianalizzare due volte. Anche se vengono rilevati anticorpi contro l'immunodeficienza quando vengono eseguite due analisi in due o quando vengono fornite tre analisi in due di esse, è imperativo che il risultato sia positivo.

L'antigene p 24 si ritrova nel sangue già dopo 14 giorni dal giorno dell'infezione. Per un metodo aggiuntivo di analisi dell'immunoassorbimento enzimatico, l'antigene compare da 14 a 56 giorni. Dopo 60 giorni nel sangue, non c'è più. Non appena SNID si forma nel corpo, ricrescerà nel sangue. Per questo, i sistemi di test e il test immunoassorbente legato all'enzima diventano suscettibili all'infezione nei primi giorni dell'infezione, per essere più significativi, invece di catturare e controllare il processo. Apparentemente la sensibilità analitica del saggio immunoenzimatico rivela l'antigene p24 in materiale biologico con IL del primo tipo ad una concentrazione da 5 a 10 pkg/ml, con IL di tipo diverso da 0,5 ng/ml o meno.

pid riassumiamo il risultato dell'analisi enzimatica si basa sul rispetto, ma quando diagnosticati, hanno avuto pietà di loro, di regola, hanno sopraffatto praticanti di medicina Per le persone, ci sono segni di informazione e il risultato è negativo, quindi le persone vengono inviate per una seconda analisi.

pid hibopositivo il risultato è il risultato, se l'analisi del sangue è interrotta all'inizio del malato:

  • vagamente;
  • quante persone hanno disturbi ormonali;
  • con banale immunodepressione.

Yak che decifra in qualche modo l'analisi? Viene messo il risultato Hibnopositive, come se ci fosse un blocco. Attraverso quelli, dove l'antigene p24 si trova ancora nelle singole varianti, quindi, con il metodo vizioso, nel primo periodo di infezione, compaiono dal 20% al 30% dei disturbi.

Quanto costa un risultato positivo del test?

Inodi all'IFA sarà risultati positivi(Approssimativamente nell'1% di vipadc_v), la ragione di un risultato simile può essere infezione virale, Ed è anche semplice. Se un risultato positivo viene rifiutato, è necessario un test più accurato: immunoblot, per i cui risultati viene fatta una diagnosi. Un risultato immunoblot positivo per un IFA positivo è affidabile al 99,9%: questa è la massima precisione per qualsiasi test medico. Se l'immunoblot è negativo, significa che il primo test sarà positivo e per la maggior parte il VIL nelle persone è stupido.

Quali sono i non valori (somme) risultato?

Se l'IFA è positivo o negativo, l'immunoblot può essere positivo, negativo o irrilevante. Il risultato dell'immunoblotting non è importante, quindi la manifestazione di una proteina prima del virus è desiderabile nell'immunoblotting, può essere prevenuta se l'infezione è stata introdotta per lungo tempo e ci sono pochi anticorpi nel sangue contro VIL, nella maggior parte casi è positivo tramite immunoblotting. Allo stesso modo, i non valori, il risultato può verificarsi con la presenza di infezione da VIL con epatite, per alcune malattie croniche di natura scambiata, ad esempio con vaginosi. In generale, l'immunoblot diventerà negativo o verrà rivelata la ragione del risultato non importante.

Quanto devi analizzare?

Immunoblot su VIL non si applica ai dosali economici. Al centro, lo screening dei metodi enzimatici di pulizia da 500 a 900 rubli. L'immunoblotting è un processo di verifica delle informazioni, la cui parte diventa da tre a cinque redditi minimi non restituibili della comunità. I metodi di piegatura più grandi sono più costosi. Ad esempio, per l'analisi della reazione lanceyuga della polimerasi (PLR), dovrai pagare quasi 12.000 rubli.

Analisi del robit?

È possibile creare un'analisi su VIL? IFA, immunoblot dovrebbe essere effettuato nella clientela privata locale, e i risultati si vedono con un tratto. Può terminnova la diagnostica. I sovrani istituzioni mediche Analizzare l'IFA e l'Immunoblotting senza tampone, in conformità con la legislazione della Federazione Russa. In conformità con la procedura generale, il trasferimento di malattie infettive alle donne, nonché ai pazienti, al fine di stabilire un ricovero ospedaliero o ad esse prontamente affidato.

La diagnosi tempestiva dell'infezione da VIL diventa molto importante nella regione, poiché K. Un orecchio precoce di una malattia può essere ricco di valore dato sviluppo sofferenti e continuando la vita dei malati. Nel resto della roccia, ci sono molti progressi nell'area del rilevamento di una terribile malattia: stanno arrivando sistemi di test più avanzati per sostituire i vecchi sistemi di test, i metodi di manutenzione sono più accessibili e la loro accuratezza è significativa .

Abbiamo un rapporto statistico sugli attuali metodi di diagnostica dell'infezione da VIL, la nobiltà, che è fondamentale per una rapida fissazione di questo problema e lo sviluppo della normale qualità della vita di una persona malata.

Tecniche diagnostiche VIL

In Russia, per la diagnosi dell'infezione da HIV, viene eseguita una procedura standard, che include due parametri:

  • sistema di test IFA (analisi di screening);
  • immunoblot (IB).

Inoltre, per la diagnostica, è possibile utilizzare i seguenti metodi:

  • express-test.

Sistemi di test IPA

Nella prima fase della diagnostica per la rilevazione dell'infezione da HIV, viene rilevato un test di screening (IPA), che può essere rilevato sulle foglie nel laboratorio delle bottiglie VIL, in modo che possa essere rilevato nel corpo per rilevare specifici antibiotici. Scrivere insieme ai reagenti (enzimi) del sistema di test e cambiare l'indicatore. Le variazioni di colore a distanza vengono elaborate su attrezzature speciali, che sono il risultato di un'analisi.

Questo test ІFA mostrerà il risultato già attraverso un piccolo numero di messaggi scritti in VIL-Infections. Questa analisi non mostra il virus, ma rivela il virus antivirus. In alcuni casi, nel corpo delle persone, gli anticorpi contro il VIL vengono riparati dopo 2 anni di infezione, ma nella maggior parte delle persone puzza in termini più grandi, dopo 3-6 volte.

Il cuore della generazione di test IFA con una brillante sensibilità. Negli ultimi giorni, i sistemi di test delle generazioni III e IV spesso diventano stagnanti, in quanto derivano da peptidi sintetici o proteine ​​ricombinanti e possono essere più specifici e accurati. La puzza può vikoristovuvatisya per la diagnostica dell'infezione da VIL, il monitoraggio dell'ampiezza del VIL e la protezione della sicurezza prima dell'ora della conversione del sangue del donatore. L'accuratezza dei sistemi di test IPA delle generazioni III e IV del magazzino è del 93-99% (test più sensibili, che vengono rilasciati nelle terre dell'Europa occidentale - 99%).

Per testare il test IPA, vengono prelevati 5 ml di sangue dalla vena del paziente. Se ne stai lontano, potresti dover passare almeno 8 anni di analisi (di norma, dovresti essere in grado di dire la verità sul tuo cuore). Si consiglia di creare tale test non prima, non dopo 3 mesi dalla trasmissione di un'infezione infetta (ad esempio, se un nuovo partner invia un atto legale non protetto).

I risultati del test IPA richiederanno 2-10 giorni:

  • risultato negativo: inavvertitamente la presenza di informazioni su VIL e non essere stato infettato prima del fallimento;
  • pomilkovo risultati negativi: può essere promosso ai primi termini di informazione (fino a 3 volte), con in diverse fasiСНІД in caso di grave immunità strozzata e in caso di errata preparazione del sangue;
  • risultato hybnopositive: può essere risparmiato in caso di malattie e in caso di errata preparazione del sangue;
  • risultato positivo: in caso di infetto VIL інфекцією, Vimagaє che esegue l'IB e la brutalizzazione del paziente al fakhivtsya nel centro di SNIDu.

Perché un test IPA può dare risultati estremamente positivi?

Risultati altamente positivi del test IPA per VIL possono essere evitati in caso di prelievo di sangue improprio, per i malati con tali campi e malati:

  • miloma multiplo;
  • Malattia infettiva, provocata dal virus Epstein-Barr;
  • mulino pislya;
  • malattia autoimmune;
  • su tlі vagіtnostі;
  • campo per la vaccinazione.

In caso di motivi gastrointestinali nel sangue, potrebbero esserci anticorpi presenti nel non specifico e il virus è provocato dall'infezione da VIL.

Negli ultimi anni, la frequenza dei risultati ipopositivi è diminuita significativamente a causa dell'uso di sistemi di test di 3a e 4a generazione, che sostituiscono il peptide più sensibile e le proteine ​​ricombinanti (la puzza viene sintetizzata per un gene aggiuntivo in un ingegnere). Con l'orecchio di tali test IPA, la frequenza dei risultati hibopositivi è diminuita significativamente e si è avvicinata allo 0,02-0,5%.

Rivelare un risultato falso positivo non significa che la persona sia informata da VIL. Si consiglia di eseguire un altro test IPA per tali tipi di VOPA (generale IV generazione).

Il letto del paziente verrà inviato al riferimento o al laboratorio di laboratorio con il segno di "ripetizione" e proseguirà con i sistemi di test IVA di IV generazione. Se il risultato della nuova analisi è negativo, il primo risultato sarà riconosciuto come misericordioso (positivo) e l'IB non verrà eseguito. Con positivo abo risultato totale Prima di un altro test, la persona malata sarà obbligata a eseguire l'IB in 4-6 giorni per la conferma o per passare le informazioni VIL.

macchia immunitaria

La diagnosi residua di infezione da VIL può essere stabilita solo dopo il rigetto di un risultato positivo immunoblotting(IB). A tale scopo, viene bloccato un piccione nitrocellulosico, viene applicato un virus allo yak.

Raccolta di sangue per ІБ vikonutsya da veni. È lontano andare alla lavorazione speciale ed essere immessi nell'apposito gel sulla carica e sul peso molecolare (la manipolazione viene effettuata sull'apposita apparecchiatura sotto il campo elettrico). Applicare uno striscio di nitrocellulosa al gel dal sangue ed eseguire la macchia ("promakivania") in una camera speciale. Se si verifica un odore sdolcinato nei materiali vikoristi anticorpi contro VIL, allora la puzza di smog antigenico su IB e si manifesta nelle linee viglyadi.

mettersi in gioco in modo positivo:

  • secondo i criteri del CDC americano - sul maschio e due o tre linee gp41, p24, gp120 / gp160;
  • secondo i criteri della FDA americana - per uomo є due linee p24, p31 e linea gp41 o gp120/gp160.

Il 99,9% dei pazienti ha un risultato IB positivo in caso di infezione da HIV.

Quando c'è una linea - IB є negativo.

Quando viene rilevata la linea da gp160, gp120 e gp41 - IB sumnivnim. Questo risultato è visibile quando:

  • malattie oncologiche;
  • vaginosi;
  • frequenti trasfusioni di sangue.

Per tali vipadka si consiglia di controllare l'ammissione ripetuta per un set aggiuntivo di іншої фірми. Se il risultato è troppo riassuntivo per l'IB preesistente, allora è necessario fare attenzione nel tenerlo (attraverso la pelle per 3 mesi dovrebbe essere eseguito l'IB).

Reazione lantsyugov della polimerasi

Un test dell'RNA può essere utilizzato per avviare un virus a RNA. La sensibilità di Yogo raggiunge l'occhio e consente l'infezione di informazioni VIL già dopo 10 giorni dall'infezione. Per alcune persone con PLR, possono dare risultati estremamente positivi, perché K. Yogo sensibilità temporale Può reagire agli anticorpi di altre infezioni.

Un metodo di diagnostica è dato a un costo, sotto forma di possesso speciale e qualifiche elevate di fahivts. Ci sono ragioni per non dare l'opportunità di effettuare test di massa sulla popolazione.

Il PLR ristagna nei seguenti cali:

  • per l'identificazione del VIL nelle donne appena nate, nate da madri informate del VIL;
  • per il rilevamento di VIL nel "periodo di вікна" o in caso di IB riassunto;
  • controllare la concentrazione di VIL nel sangue;
  • per la donazione del sangue del donatore.

Solo secondo il test PLR, la diagnosi VIL non viene posta, ma viene eseguita sotto forma di un metodo diagnostico aggiuntivo per determinare situazioni spirituali.


Metodi espressi

Una delle innovazioni nella diagnosi di VIL è diventata espressiva, i cui risultati possono essere valutati anche dopo 10-15 minuti. I risultati più efficaci e accurati sono seguiti da ulteriori test immunocromatografici basati sul principio del flusso capillare. La puzza è un fango speciale, su cui viene applicato un tetto, o anche un ridini doslidzhuvani (slina, slash). Con la presenza di anticorpi contro VIL, dopo 10-15 chiline, il test risulta in un test del colore e un grasso di controllo - un risultato positivo. In caso di risultato negativo, appare solo il controllo più uniforme.

Yak e dopo i test dell'IPA, i risultati delle prove espresse dei colpevoli sono stati confermati dall'analisi dell'IB. Solo quando viene fatta una diagnosi sulle informazioni VIL.

Set di lavaggio express per impasti fatti in casa. Test OraSure Technologies1 (USA) approvato dalla FDA, venduto senza prescrizione medica e può essere utilizzato per il rilevamento di VIL. Se il test viene effettuato, in caso di esito positivo, si raccomanda che il malato si sottoponga a test in un apposito centro per la diagnosi.

Il test Rashta per un vittoriano fatto in casa non è ancora stato accettato dalla FDA e il risultato può essere ancora più sommabile.

Poco importante per coloro che esprimono i test IVA per la loro accuratezza, la puzza è ampiamente stagnante per la popolazione pre-test.

Puoi creare un'analisi per la rilevazione dell'infezione da VIL in qualsiasi policlinico, TsRL o in centri SNID speciali. Sul territorio della Russia, le puzze sono tenute in modo assolutamente confidenziale o anonimo. Un paziente con la pelle può essere ricompensato per una consulenza medica o psicologica prima di eseguire qualsiasi analisi. Il pagamento per il test sul VIL sarà pagato solo nei dispensari commerciali, e nei policlinici statali e le puzze, le puzze andranno perse.

A proposito di coloro che possono essere infettati da malattie infettive e infettive VIL, leggi le possibilità di contrarre l'infezione.