رد فعل الحلقة التكميلية مع مستضد nircovym. ردود الفعل القابلة للطي للتشخيص المناعي

ستورينكا 33 ض 91

تفاعل تكميلي (RSK)
تحضير المستضد والمستضد التكميلي لا يتم فرضه بالضرورة على المستضد. تسي. في العالم الكبير ليتم نقلها إلى الميكروبات ، والتي تظهر قوة للمكملات اللايتية. أولئك الذين يرون في مثل هذه القطرات التكميلية يمكن رؤيتهم بشكل غير مباشر وراء طريقة إضافية ، كما هو موضح من قبل J. Bordet و S. Zhang. جوهر الطريقة مسيئة. مع تفاعل جهاز المناعة مع مستضد محدديتم التعرف على المستضد مع المستضد ، ويتم إنشاء مجمع المستضد مع المستضد ، والذي سيربط المكمل. إذا كان المستضد غير كافٍ ولم يكن الجسم المضاد مرتبطًا بالمكمل ، فسيتم فقد الإنزيم. تصبح عملية ربط المكمل برد فعل إيجابي للمستضد مع المستضد غير مرئية. لهذا الغرض ، إذا تم ربط المكمل ، أو في حالة فقد المكمل ، كمؤشر ، يتم إدخال النظام الانحلالي في التفاعل (syrovatka الانحلالي - انحلال الدم و erithrocytes من ذاكرة الوصول العشوائي). يتم ضبط تفاعل الحلقة التكميلية على مرحلتين: في المرحلة الأولى ، حتى يتم الوصول إلى المستضد والمكمل ، في المرحلة الأخرى ، يتم توفير النظام الانحلالي.
حتى في المرحلة الأولى من التفاعل حتى يتم اكتشاف التفاعل ، فإن المستضد الخاص بمولد الضد ، ثم يتم تطبيق المكمل على معقد المستضد + المستضد ، إذا تمت إضافة النظام الانحلالي وانحلال الدم ، فلن يكون التفاعل إيجابيًا .
لا يمكن الانتقام من أجسام مضادة معينة ، أي E. لا يظهر المستضد والأجسام المضادة واحدًا لواحد ، بينما يكون المكمل في المرحلة الأولى من التفاعل سيئًا للغاية وعندما يتم تقليل أنظمة الانحلال الانحلالي السلبية لانحلال الدم. الشكل 57 ).
رد فعل Bordet-Zhangu (مكمل رنين رد الفعل) ، scho Volodya حساسية عاليةنابولا الكبير قيمة التشخيص... ارتفع السعر أكثر إذا أظهر Zhangu أن التفاعل يمكن رؤيته ليس فقط مع الأجسام البكتيرية ، ولكن أيضًا مع المستخلصات. يتجمد رد فعل Borde-Zhangu عند تشخيص الرعام والسيلان والمرضى. ذهب A. Wasserman إلى أفكار J. Bordet ، بعد أن تمسك برد الفعل على مكمل التشخيص المصلي ، الزهري. رد فعل Qia مص عمليفي شكل مرض الزهري.
رد فعل رنين المكمل عالق بطريقتين:

1. للكشف عن الأجسام المضادة المحددة في syrovattsi من أجل مستضد من الأنواع الإضافية. على سبيل المثال ، إذا كنت تحاول تحضير مستضد لتحضير ثقافة المكورات البنية ، فيمكنك العثور على مستضدات المكورات البنية في شخص مريض. بشكل عام ، من الضروري علاج المستضد ، الذي يبدو أن جرعته مكملة لعدد كبير من الأمراض.
2. لتحديد نوع المستضد وراء المستضد التكميلي ، من الضروري الانتقام من المستضد قبل المستضد الغنائي. على سبيل المثال ، بمساعدة جهاز مناعي معين ، من الممكن التعرف على السعال. في cich vipads ، تحتاج الأمهات إلى نظام مناعة قوي ، عياره هو vidomy.

تفاعلات Ingredinti (أجزاء المستودعات). لتفاعل اتصال المكمل ، يلزم ما يلي: 1) كريات الدم الحمراء من ذاكرة الوصول العشوائي ، 2) Syrovatka الانحلالي ، 3) مكمل ، 4) مستضد و 5) viprobuvanny syrovatka.
1. يتم التعرف على كريات الدم الحمراء من خلال الكشف عن دم الكبش. لكي يحتمي الكبش من الوريد الوداجي ، دون الحاجة إلى الوسط ، في جرة بها خرز زجاجي. مبعثر بامتداد 10 لحافات. المضي قدما من خلال شاش معقم ، والطرد المركزي وتجفيف السائل. شاهد ثلاث مرات كريات الدم الحمراء من الفائض التمييز الفسيولوجيأجهزة الطرد المركزي من كلوريد الصوديوم بامتداد 10-15 كويلن. بالنسبة للطرد المركزي الثالث للحصار ، يتم تحضير تعليق 3 ٪ من كريات الدم الحمراء للقبول. عندما تحصل على مأوى منزوع العيوب ، يمكنك التعود عليه لمدة 6-8 أيام.

مخطط التحضير لتخفيف Syrovat الانحلالي من التخفيف الرئيسي 1: 100

1. يستيقظ سيروفاتكا من نوع Hemolithic ليذهب كأرانب ، ويتم تحصينه بواسطة كريات الدم الحمراء في الكبش. يجب وضع شراب انحلال الدم في كوب جاف من معهد المستحضرات البكتيرية. على ملصق الأمبولة ، يشار إلى عيار syrovate ومصطلح الالتزام.

الجدول 4
مخطط معايرة انحلال الدم

يسمى عيار syrovat الانحلالي її التخفيف الحدودي ، بالاشتراك مع 0.5 مل من 0.5 مل من 3 ٪ معلق من كريات الدم الحمراء في وجود 0.5 مل من المكمل لفترة طويلة عند درجة حرارة 37 درجة.
يجب أن يعتمد عيار syrovat الانحلالي على المخطط الهجومي: لتحضير التخفيف الرئيسي للدوامة 1: 100 (0.1 مل من syrovat + 0.9 مل من المحلول الفسيولوجي) ، والذي يجب استخدامه للتخفيف (الجدول 3 ).
في عدد من أنابيب الاختبار ، واحدة تلو الأخرى ، أضف 0.5 مل من نفس التخفيف من Syrovat الانحلالي ، وإصلاحه عند 1: 1000 ، أضف 0.5 مل من المكمل المخفف 1:10 إلى أنبوب اختبار الجلد ، و 0.5 مل من 3 ٪ تعليق الخلايا الشحمية. يتم إجراء معايرة Syrovatos الانحلالي وفقًا للمخطط (الجدول 4).
من المخطط ، يمكن ملاحظة أن الجرعة تُعطى في 1 1500 يوم مخفف من انحلال الدم (أي ، المعايرة هي 1: 1500). من الضروري تناول 3 مرات تخفيف أقل (العنوان الثالث) للجرعة. لذلك ، على سبيل المثال ، إذا كان عيار Syrovat الانحلالي هو 1: 1500 ، فإن معدل التخفيف هو 1: 500 (أي 0.1 مل من syrovat هو 49.9 مل من النمو الفسيولوجي).

1. تكملة يكمل الياك في رد فعل لخدمة syrovatka خنازير غينيا(Їx مكمل maє أكثر نشاطا) مكمل أبو جافة ، الذي تفرزه معاهد المستحضرات البكتريولوجية.

لذلك ، نظرًا لأن خطوات النشاط التكميلي ليست هي نفسها بالنسبة لجميع خنازير غينيا ، فمن الضروري الاحتماء من بعض المخلوقات و іtrimanі sirovaty zmіshuvati.
عيار المكمل يعني الباشا ، الحد الأدنى لجرعة المكمل ، وهو تعريف كريات الدم الحمراء. إذا ، على سبيل المثال ، في تحريض مخطط المعايرة ، يتم وضع انحلال دم إضافي في العينة ، بحيث يتم استبدال 0.3 مل من المكمل ، ويظهر انحلال دم غير كامل في الاختبار ، والذي سيحل محل 0.25 مل من المكمل ، ثم يتطلب عيار المكمل 0.3 مل في الورد: 10. في قدرة الجرعة الروبوتية للمكمل ، يتم أخذ العيار ، بزيادة 20-25 ٪ ، أي يتم أخذ نفس الكمية تقريبًا من المكمل ، لأنه يحدث في اختبار مفرط مع انحلال الدم.
الياك في حالة معايرة المحاقن الانحلالي ، وفي حالة معايرة المكمل ، يتم تعيين عنصرين تحكم (div. الجدول 5).

مخطط المعايرة التكميلية الخالية من المستضد


الجدول 6
مخطط معايرة المكمل في وجود المستضد

إلى جانب ذلك ، يوصى بمعايرة المكمل أيضًا في وجود مستضد.
تعد معايرة المكمل في وجود المستضد ضرورية في القطرات الهادئة ، إذا قام المستضد بإحضار العيار إلى المكمل (القدرة المضادة للتكميلية إلى المستضد). يمكن أن تكمن قوة المستضد نفسه نتيجة لطبيعة المستضد نفسه ، وكذلك في طريقة تحضيره.

1. مولد المضاد. في رد فعل ربط المكمل ، يتم تشكيل مجموعة متنوعة من المستضدات. المستضدات زراعة الميكروبات الرشيقة أو الأنسجة الطبيعية المتغيرة بشكل غير طبيعي يمكن استخدام كلا المستضدين البكتيريين كتعليق للميكروبات في شكل فسيولوجي ، وكذلك مقتطفات من الميكروبات المحضرة بطرق مختلفة (على سبيل المثال ، مستضد المكورات البنية المستضدية ، والسل الكحولي ، وما إلى ذلك). بفضل القوى المستضدية اللطيفة للتعليق الميكروبي فولوديا ، يتم اختراقه بأبخرة الفورمالين ، أو يتم رشه بالكحول. بالنسبة للتفاعل ، يجب تخفيف تعليق مولد الضد وفقًا للمعيار البصري ، والذي يجب انتقامه. 1 مليار ميكروبي في 1 مل ، ويأخذ 0.5 مل في المجموع.

في قدرة المستضد ، من الممكن أيضًا ركود lizates الميكروبية في الماء المقطر أو الانهيارات الفسيولوجية ، أو في جهاز المصراع (جهاز التجريد) ، أو عن طريق الفتات المضادة للتشكيل.
من أجل أن يأخذ رد الفعل مثل هذه الجرعة من المستضد ، حيث أن التفاعل سيزيد من انحلال الدم مع المحاقن ، للتعويض عن أي انحلال للدم ، ولكن لا يمكن التقاط انحلال الدم من تلقاء نفسه. نظرًا لحقيقة أن جميع المستضدات الميكروبية تمتص جزءًا من المكمل ، قبل المعايرة ، يتم تحويلها إلى قوة مضادة للتكميلية ، ويتم وصف جرعة من المكمل ، أي يتم انتهاك قيمة هذه الجرعة من المستضد وفقًا للمخطط (الجدول 7).
يوضح الجدول أنه في هذا التطبيق ، تصبح جرعة تذويب المستضد 0.4 مل. لمزيد من المعلومات ، خذ نصف هذه الجرعة ، أي أن الجرعة العادية ستكون 0.2 مل.

1. فيبروبوفانا سيروفاتكا. يتم إزالة سيروفات المريض من الجلطة بعد 3-48 سنة بعد أخذ الدم وتعطيله في حمام مائي عند 56 درجة لمدة 30 دقيقة.

الجدول 7 مخطط تخصيص الجرعة للمستضد

يمكن تخزين الطعام المعطل في الثلاجة لمدة 5-6 أيام. بالنسبة للتفاعل ، يكون سيرروفات المريض راكدًا في التخفيف 1: 5 (0.1 مل من syrovat + 0.4 مل من الورد الفسيولوجي).
الإعداد لرؤية رد فعل الحلقة التكميلية (الجدول 8).
لصياغة تفاعل الارتباط التكميلي ، تحتاج إلى المكونات التالية:

1. الاختلافات الفسيولوجية (0.85٪) ؛
2. sirovatka ، scho pidlyagaє إلى الحمأة ، يتم تنشيطه عند 56 درجة مع امتداد 30 ريشة في حمام مائي ؛
3. مستضد (معلق للبكتيريا أو مستخلص منها) ، والذي لا يحدث بشكل مستقل أو انحلال الدم ، ولا يتم تناوله بجرعة محددة بالمعايرة ؛
4. مكمل بجرعة العمل المحددة للمعايرة ؛
5. syrovatka الانحلالي بجرعة مماثلة للعيار السفلي ؛
6. 3٪ معلق من كريات الدم الحمراء في الأغنام.

يؤخذ Kozhen s Ingredіntіv ، وهو راكد للتفاعل ، في زجاجة 0.5 مل. إذا كانت جرعة مكون okremogo أصغر ، فيجب استكمالها بتفكك فسيولوجي يصل إلى 0.5 مل.
يجب تحديد الجرعة الرئيسية للوصلة المكملة على الفور من مستضدين أو ثلاثة مستضدات محضرة بطريقة مختلفة (A1 ، A2 ، A3 في الجدول 8).

مخطط المعلومات الأساسية

للتحكم ، من الضروري وضع رد فعل على الفور في نفس العقول تمامًا مع استجابة طبيعية وإيجابية ، وربما تعطي نتيجة إيجابية. عند إجراء تفاعل ، يمكن تقليل كمية المستضد والمكملات. وميض عند 37 درجة لمدة عام. عند الانتهاء من المصطلح المشار إليه ، تتم إضافة كمية الخلايا الانحلالية وكريات الدم الحمراء إلى أنبوب الاختبار - النظام الانحلالي. يتم تكميل الجهاز الانحلالي دون الحاجة إلى تحضير متوسط ​​الحجم لمجموع خلايا الدم الانحلالي وكريات الدم الحمراء ، على سبيل المثال ، لإعداد مجموع المبالغ في منظمات الحرارة. يتم وضع مجموع جميع مكونات تخزين الطاقة في منظم حرارة عند 37 درجة لمدة عام واحد ، ثم يتم نقلها لمدة 12 عامًا إلى الثلاجة أو في درجة حرارة الغرفة.
في أنابيب الاختبار ، حيث يتم وضع انحلال الدم ، يصبح العمر واضحًا ، ale pofarbovanoi (div. الشكل 58).

صغير. 58. مخطط تفاعل الارتباط التكميلي.
أ - رد الفعل إيجابي ؛ ب - رد الفعل سلبي.

يتم الإشارة إلى نتيجة التفاعل إما بعبارة "إيجابي" ، أو رد فعل "سلبي" ، أو بعلامة زائد (+) أو ناقص (-). إذا كان الأمر كذلك ، فيمكن رش خطوات انحلال الدم بين فترات كل بقعة ، حتى تصبح ضعيفة ، مما يعني أنها قد تكون في الطريق:
(++ + +) - تجديد انحلال الدم ؛ ريدنا ليست مزروعة ، حصار كبير من كريات الدم الحمراء ؛
(+ + +) -من الواضح تغطية انحلال الدم ؛ rіdina zabarvlena ، حصار كريات الدم الحمراء.
(++) - تغطية جزئية لانحلال الدم ؛ Ridina تصلب بشكل مكثف. حصار مضغوط من كريات الدم الحمراء.
(+) - انحلال الدم مغطى بشكل ضعيف ؛ rіdina منعت بشكل مكثف ، الحصار ليس كبيرا ؛
(±) - إذا تم اكتشاف انحلال الدم ، إذا كان هناك حصار طفيف ؛
(-) - انحلال الدم الثانوي (رد فعل سلبي).

(RSK) مقترح من قبل J. بوردі س. تشانغو... يشمل التفاعل مرحلتين (الشكل 10-18).

تفاعلات المرحلة الأولى (المحددة) من تفاعلات تكميلية طويلة الأمد (RSK)يتفاعل shukaniy Ar (abo AT) مع antisirovatki التشخيصي (abo Ag-Diagnostics) والمكملات. التأكيدات المعقدة Ag-AT pov'yazuє تكملة.

المرحلة الثانية (المؤشر) رد فعل التكملة المتبقية (RSK)في هذه الحالة ، يكون من الواضح ظهور مكمل قابل للتطبيق في وسط رد الفعل للنظام الانحلالي - كريات الدم الحمراء في الكبش والسيروفات الانحلالي - بحيث يجب استبدال AT قبلهما. إذا لم يتعرف Ar و AT على واحد لواحد ولا يؤسسان مجمعات مناعية ، فلن يتم التعرف على رنين المكمل. في tsyomu. يرتبط مكمل vilny بمكونات النظام الانحلالي ، المثبت على مركب AT المضاد لخلايا الدم الحمراء. طعم هذا - انحلال الدم للخلايا المؤشر (ظاهرة "ورنيش الدم") - رد الفعل سلبي.

Yaksho في تفاعل المرحلة الأولى للربط التكميلي (RSK) AT و Ar يرى واحدًا إلى واحد ، ثم يتم ضبط المركب المناعي لربط مكمل ، مما يؤدي إلى تدمير خلايا الدم لإدخال نظام الانحلالي ولا يعزز ويكون رد الفعل إيجابيًا. أوجه القصور الرئيسية في RSK: الطي (بما في ذلك 5 مكونات) ، قابلية المكونات [يجب أن تكون gotuvati مباشرة قبل التفاعل (مكمل) ، لبضعة ديب (خلايا دم الكبش)] وهناك إمكانية قوية مكافحة المكمل حماية RSK من الركود في تشخيص مرض Bagatoch ، على سبيل المثال ، في تشخيص مرض الزهري (تفاعل Wassermann).

يستخدم RSK على نطاق واسع ل التشخيص المختبريالأمراض التناسلية ، الريكتسيات ، الالتهابات الفيروسية. رد فعل ضد مرحلتين. مرحلة البرشا- تفاعل المستضد والأجسام المضادة للمشاركة التكميلية الملزمة. صديق- الكشف عن نتائج التفاعل لمؤشر إضافي للنظام الانحلالي (الكريات الحمر الكبريتية و syrovat الانحلالي). لا تؤخذ Ruinuvannya الكريات الحمراء للدم sirovatkoy إلا في أوقات إرفاق مكمل للنظام الانحلالي. على الرغم من أن المكمل قد تم امتصاصه في وقت سابق على معقد المستضد-المستضد ، إلا أن انحلال الدم في كريات الدم الحمراء لا يحدث. في حالة وجود مظاهر في المضادات الحيوية قبل الأحداث، مكمل للمستضد ، تم إنشاء مجمع الأجسام المضادة للمستضد - المستضد - pov'yazuє (كثف) على مكمله الخاص. مع أنظمة انحلال الدم المضافة لا يحدث انحلال الدم (تغطي انحلال الدم ) هذا هو السبب في أن كل مكمل الاحتشاء موجود على الرابط المحدد لمركب المستضد-المستضد ، وأصبحت كريات الدم الحمراء غير مهمة. عندما لا يكون هناك مضاد للفيروساتمكملًا للمستضد ، لن يتم إنشاء معقد المستضد-المستضد المحدد ولن يتم ربط المكمل. لذلك ، مع إضافة أنظمة الانحلالي ، يجب إحضار المكمل إليها. ستكون نتيجة رد الفعل في هذا vypadku انحلال الدم كريات الدم الحمراء - في أنابيب الاختبار لتثبت نفسها ما يسمى بالمأوى "المطلي بالورنيش".

صغير. 6. مخطط RSK: أ- يظهر نظام المؤشر (كريات الدم الحمراء والأجسام المضادة قبلها) في وجود تكملة في وجود انحلال الدم ؛ ب- بمساعدة شخص مريض ، يؤكد التشخيص (Ag) المركب المناعي والمكمل النشط ، والنتيجة هي انحلال الدم ؛ الخامس- في sirovatsі شعب عظيم antityl nemaє ، يتم تنشيط المكمل بواسطة نظام المؤشر ، والنتيجة هي انحلال الدم.

ردود الفعل على ركود الرجال والنساء

تشكل ردود الفعل على اختبارات المستضدات والمستضدات المختلفة أساس طرق التشخيص السريع للأمراض المعدية ، وذلك للكشف عن أصغر كمية من Ag و AT في الدراسات الحديثة. يمكن استخدام Yak mіtok كإنزيمات vikoristanі ізні ، و barvniks مع الفلوروكروميات والنظائر.

تفاعل التألق المناعي (RIF) الطريقة الدنماركية معبرة وحساسة للغاية. شاهد اثنين من أحلام اليوجو. في مباشرةطرق لإضافة معلق ميكروبي ، مثبتة على البلاطة ، لإضافة سيروفات ، المسمى بالفلوروكروم. معقد المستضد-المستضد للإضاءة بواسطة تبادل الأشعة فوق البنفسجية (الأزرق البنفسجي) نعم شموع خضراء زاهية... في غير مباشر RIF vikoristovuyut تشخيص استثنائي ضد أي نوع من الميكروبات. استكمال المعلق الميكروبي بالمعلق الميكروبي لمجمع المستضد-المستضد. يظهر المركب بأكمله وراء مساعدة مصل فلورسنت عالمي ، للانتقام من الأجسام المضادة لجزء جاماجلوبيولين من دم هذا النوع من المخلوقات ، مثل الرصاصة التي يتم التعرف عليها على أنها مصل تشخيصي. يتطور المجمع مع الفحص المجهري اللمعان.

صغير. 7. رد فعل التألق المناعي (مخطط).

مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (IFA) يعتمد أساس مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم على نوع الاستجابة المناعية للمستضد والأجسام المضادة. أحد الكواشف هو الخطاب الأولي ، والثاني هو كيف يُفترض أن يكون للخصوصية المعيارية (الاهتزاز) وفقًا للإشارة إلى الخطاب المُلخص. تم إنشاء المجمعات المناعية (مستضد - مستضد) للكشف إنزيمالمكون (مستضد أو مستضد) مُسمى أمام المقدمة. الإنزيم نفسه ، بطبيعة الحال ، غير مرئي ، وتصور وجود الكلام ، الذي يبدأ بواسطة طريقة IPA ، يصل إلى منتصف الوسط - الكروموجين... إنه مبهج بشكل خاص من سبولوكا ، لأنه من الجيد أن تكون عند الماء ، وهو غير متوازن. التناسخ من الكروموجين بارليس في خطاب colorove كروموفورلكل كروموجين هو ركيزة.

صغير. 8. تحليل الإنزيم المناعي (مخطط).

الضبط الذاتي- الخطب ، كما يمكن أن تنتصر ردود الفعل المناعية في الجسم ، بسبب رائحة الرفض النتنة. Їх للانتقام من الدماغ ، كريشتاليك للعين ، الحيوانات المنوية ، الغدد الجار درقية ، متجانسات الحشرات ، الشكيري ، نيروك ، الكبد والأنسجة الأخرى. لذلك ، في الأذهان الشريرة من المستضدات الذاتية ، لا تأتي إلى القفل اجهزة المناعةلا يمكن تحديد الأجسام المضادة لبعض الخلايا والأنسجة. ومع ذلك ، عندما يتم تجميع الاستنتاج الذاتي للنسيج ، يمكن أن يصبح رطبًا ويفشل في تكوين مستضد ، مما يعطي استجابة كبيرة لظهور الخلايا. يمكن أيضًا العثور على المستضدات الذاتية في خلايا الدم والأنسجة للتبريد ، والحقن الطبية ، والعدوى بالفيروسات ، والبكتيريا والسموم البكتيرية ، على سبيل المثال ، بكتيريا المكورات العقدية ، وبكتيريا المكورات العنقودية تمت الموافقة على الرائحة الكريهة في العديد من الحالات بسبب تدهور خصوصية مستضدات vlast في الجسم.

الأجسام المضادة ، كونها جزيئات بروتين جلوكوز قابلة للطي ، هي نفسها أيضًا مستضدات. هناك ثلاثة أنواع من محددات المستضدات (النخب) في مستودعاتهم: izotypes ، allotypes و dіotypes.

تُعد النماذج izotypes محددات ، حيث توجد فئات وأنواع من الرماح المهمة وخيارات لرئتي lambda و lambda.

Allotype - محدد ، والذي يتم ترميزه بواسطة أليلات جين الغلوبولين المناعي المعطى.

الأنماط الذاتية - محددات المستضدات ، التي أنشأتها المراكز النشطة لجزيئات الأجسام المضادة.

في جزء صغير من فئة IgG ، تكون النوبة قريبة من 75٪ من كمية جميع الغلوبولين المناعي في دم البشر.

تفاعل الارتباط التكميلي (RSC) في حقيقة أنه عندما يتم اكتشاف مستضد واحد والجسم المضاد ، يتم تكوين المركب المناعي ، حتى يتم توصيل المكمل (C) بمركب المستضد من خلال جزء Fc من الجسم المضاد ، أي ... إذا لم يؤكد معقد المستضد-المستضد نفسه ، فسيتم فقد المكمل.

يشرف التفاعل المحدد بين AG و AT على تكملة الامتصاص (الروابط). لم تظهر تذبذبات عملية ربط المكمل بصريًا ، فقد دعا J. Bordet و O. Zhangu إلى نظام الانحلالي (الكريات الحمراء + syrovat الانحلالي) ، مثبتًا مجمع AI-المكمل. يتوافق Yaksho AG و AT مع واحد إلى واحد ، أي إذا تم إنشاء المجمع المناعي ، فإن المكمل يسمى مجمع الصم ولا يحدث انحلال الدم. إذا لم يُظهر AT AH ، فإن المركب لا يؤكد نفسه والمكمل ، في حالة فقده ، سيتم الخلط بينه وبين نظام آخر وانحلال الدم المتقطع.

المبالغة في رد الفعل

رد فعل ضد مرحلتين لمشاركة نظامين ؛ البكتيرية والانحلالي. في التفاعل الأول (المحدد) ، يشارك مستضد 4 + مستضد + مكمل. تتميز النتيجة الإيجابية للتفاعل ، الذي يحدث عندما يكون هناك مستضد واضح لمولد ضد ، بتأكيد مستضد معقد بكتيري معقد مع مكثف ، أو ، على ما يبدو ، مكمل "مقيد". تجاهل غير مرئي ، والمجمع ليس فيكليك نياكيخ zvnishnіkh zmіnمن ذلك المكان الأوسط ، في yak_y vіn ، بعد أن أسس. تكون النتيجة السلبية لـ RSC منخفضة في حالة عدم وجود جراثيم محددة ومستضد ومستضد في مصل الدم وتتميز بتجنب المكمل النشط. يمكن تنفيذ المرحلة الأولى من RSC في منظم حرارة عند 37 درجة مئوية (1-2 ساعة) أو في الثلاجة عند 3-4 درجات مئوية (18-20 سنة). مع الفهم التافه للأجسام المضادة للمستضد المعقد المناعي في البرد ، هناك استجابة أكبر للمكمل وتصبح حساسية التفاعل أكثر وضوحًا. عند عرض الأوهام المسامية بواسطة عالم المناعة في راديانسكي ، أكاد. السادس. من ناحية أخرى ، أظهر العلماء أنه في أذهان حلقة تافهة من المكمل في البرد ، من الممكن التقاط مستضد أقل بنسبة 100-500 مرة ورفض النتائج الإيجابية في حالة التكاثر الكبير لجهاز المناعة ، بدون تحتاج لوصلة درجة حرارة تدوم من ساعة إلى ساعتين. تؤخذ المرحلة الأخرى من التفاعل (المؤشر) بين كواشف النظام الانحلالي (مجموع 3٪ معلق من خلايا الدم وحمض الانحلالي في السائل) عند درجة حرارة 37 درجة مئوية مع وجود تفاعل تكميلي). عندما لا يكون هناك مكمل نشط ، فإن انحلال الدم في كريات الدم الحمراء لا يتم غمره بهيمولايسينات معينة (يكون التفاعل إيجابيًا).

عناصر

يشار إلى التفاعلات التكميلية (RSK) إلى تفاعلات مصلية قابلة للطي. من أجل її تنفيذ 5 مكونات ضرورية ، ونفسها: AG ، AT ومكمل (نظام Persha) ، كرات الدم الحمراء الكبريتية و syrovatka الانحلالي (نظام آخر).

يمكن أن يكون مستضد RSK عبارة عن استنبات الكائنات الحية الدقيقة المقتولة ، والمتحللات ، ومكونات البكتيريا ، والأعضاء الطبيعية المتغيرة مرضيًا ، ودهون الأنسجة ، والفيروسات والمواد المحتوية على فيروسات.

الياك لاستكمال vikoristovyt sv_zhu أو خنزير غينيا sirovatka الجاف.

آلية التفاعل

يجب تنفيذ RSK على مرحلتين: المرحلة الأولى - حضانة المجموع ، للانتقام من ثلاثة مكونات مستضد + مستضد + مكمل ؛ المرحلة 2 (المؤشر) - في قمة المكمل عن طريق الإضافة إلى نظامه الانحلالي ، والذي يتم تخزينه من كريات الدم الحمراء في الكبش ، والمصل الانحلالي ، من أجل الانتقام من الأجسام المضادة لها. في المرحلة الأولى من التفاعل ، عندما يتم إنشاء مجمع المستضد والمستضد ، يتم تلقي المكمل ، وفي المرحلة الثانية ، لا يتم الكشف عن انحلال الدم في كريات الدم الحمراء المحسّسة للمستضد ؛ رد الفعل إيجابي. على الرغم من أن المستضد والمستضد لا يظهران واحدًا إلى واحد (بمعنى ما قبل الإحساس بعدم وجود مستضد أو مستضد) ، فإن المكمل سيكون مفقودًا في المرحلة الثانية ، للوصول إلى مجمع الخلايا الشحمية - الأجسام المضادة المضادة للخلايا الخلوية ، والأجسام المضادة الشرسة ؛ رد الفعل سلبي.

مص

يمكن استخدام الاستجابة التكميلية من أجل:
1) الكشف عن أجسام مضادة محددة في الطبيعة غير البشرية على أساس العلاقة مع مولد ضد ذات طبيعة محددة ؛
2) تلقيح قوة المستضد في التفاعل مع syrovatka معينة. تحضير المكونات لإنتاج RSK.

1. دم Syrovatku ، المأخوذ من أجل التقدم ، قبل إعداد التفاعل مبرمج في حمام مائي عند 56 درجة مئوية مع امتداد 30 دقيقة لتفعيل مكمل vlast. يمكن تخزين التعطيل في درجات حرارة 3-4 درجة مئوية لمدة 5-6 أيام. في يوم الإعداد ، قم بتخفيف المحلول الفسيولوجي بكلوريد الصوديوم بنسبة 1: 5 (0.1 مل من العصير الأولي ، + 0.4 مل من كلوريد الصوديوم متساوي التوتر).

2. يمكن أن يكون المستضد لإنتاج DSC عبارة عن الميكروبات والبكتيريا والمستخلصات المستزرعة ، والقضاء عليها من الثقافات الميكروبية ، والأعضاء والأنسجة الطبيعية المتغيرة بشكل مرضي. يتم تحديد خصائص تحضير المستضد من خلال طبيعة العملية المعدية وخصائص الطفل.

3. استكمل є sum_sh من sirovatok ، مأخوذ من 3-5 خنازير غينيا صحية ، أو مكمل جاف في أمبولات.

قبل الزرع ، يجب أن تتم تربية خنزير غينيا بمستوى فسيولوجي من الكلوريد "أتريا بمعدل 1: 10 ، ويجب قبول razchin الرئيسي.

4. syrovatu للدم قبل الانطلاق لتنشيط البرامج عند درجة حرارة 56 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. لتحديد الجرعة الرئيسية من RSK ، وكذلك لمعايرة المكمل والمستضد ، يتم تخزين الغشاء الزليلي الانحلالي في العيار المطلوب. على سبيل المثال ، إذا كان عيار syrovatka الانحلالي هو 1: 1800 ، فإن معدل التفاعل هو 1: 600.

5. كرات الدم الحمراء otrimuyut من دم الكبش منزوع الرجفان. مأوى لمرشح vidalennya plyvok fibrinu من خلال مرشح الشاش trisharovy. يتم طرد المرشح Otrimaniy بالطرد المركزي ، ويتم ترطيب السيروفات وصبها ، ويتم شطفها بـ 3-4 أجهزة طرد مركزي من izotov - "بدرجة عالية من كلوريد الصوديوم. مع بقية اختلاط حمام كريات الدم الحمراء ، فإن كرة rіdini الطافية مذنبة ولكنها يمكن تمييزها تمامًا. من كريات الدم الحمراء ، يتم تحضير معلق بنسبة 3 ٪ في كلوريد الصوديوم الفسيولوجي. بعد تحضير معنى الطعام بطريقة المكوّنات ، كما نشارك في RSK ، نبدأ قبل معايرة syrovat الانحلالي والمكمل والمستضد.

يعتمد تفاعل الربط التكميلي (RSK) على حقيقة أن معقد المستضد-المستضد المحدد يتم امتصاصه في المكمل (pov'yazuє).

يكون رد الفعل راكدًا على نطاق واسع في التعرف على المستضدات وفي التشخيص المصلي للعدوى ، خاصة في حالات الإصابة باللولبيات (تفاعل واسرمان) والكساح والفيروسات.

RSK هو تفاعل مصلي قابل للطي. يأخذون دور مكمل ونظامين ومستضد - الأجسام المضادة. في اليوم ، اثنين من ردود الفعل المصلية.

النظام الأول يدور حول تكوين المستضد والمستضد (واحد فيدومي ، بريء). بالنسبة لها ، أعطي قدرًا من الغناء مكملًا. بسبب استجابة المستضد والمستضد للنظام بأكمله ، تم العثور على الرائحة الكريهة واستكمال الأصوات. بعد إنشاء مجمع التشتت الجاف ، فإنه غير مرئي.

حول تغطية المجمع ، يجب على المرء أن يعرف عن مساعدة نظام آخر وانحلالي أو مؤشر. لديها كريات الدم الحمراء في الكبش (مستضد) وسيروفات انحلالي (مستضد) ، أي مركب مناعي جاهز. في نظام تحلل كريات الدم الحمراء بالكامل ، يمكن أن يكون فقط في وجود مكمل. إذا كان تكملة الضمادات مع النظام الأول (إذا كان هناك تغيير في المستضد والجسم المضاد) ، فلن يكون انحلال الدم موجودًا في الأنظمة الأخرى - حيث لا يوجد تكملة جيدة. معدل انحلال الدم (بدلاً من أنبوب الاختبار يكون كارثيًا ، أو في الجزء السفلي من حصار كريات الدم الحمراء) ، يجب استعادة نتيجة RSK إيجابية.

على الرغم من أن المستضد في النظام الأول لا يُظهر مستضدًا ، فإن المركب المناعي لا يثبت نفسه ويفقد المكمل! بمجرد أن يصبح الأمر رائعًا ، يعتني المكمل بمصير الأنظمة الأخرى ، يكون انحلال الدم شريرًا - نتيجة RSK سلبية (بدلاً من probirok prozoro - "ملجأ ورنيش").

مكونات التفاعل التكميلي:

المستضد - lick lysate ، مقتطف ، hapten ؛ أقدم تعليق.

1- نظام الجسم المضاد سيروفاتكا
2. تكملة - خنازير غينيا

3-المستضد - كريات الدم الحمراء

4. الأجسام المضادة - الهيموليزين لكريات الدم الحمراء

5- روزكين الأيزوتونيك

سوف أنظر إلى أولئك الموجودين في RSK ، وأعتني بمصير عدد كبير من المكونات المعقدة ، والرائحة الكريهة مذنبة قبل معايرتها وتدخل في رد الفعل بالأرقام الدقيقة وفي الحالات المعتادة: 0.5 أو 0.25 لكل منهما ، حتى 0.2 مل. على ما يبدو ، يجب أن يتم تنفيذ الجرعة بأكملها في المجموع 2.5 أو 1.25 أو 1.0 مل (التقارير الرائعة تعطي نتيجة أكثر دقة). يجب إجراء معايرة مكونات التفاعل في نفس الاتصال ، حيث يتم وضع المعلومات ، لاستبدال المكون المفقود بانهيار فسيولوجي.

تحضير المكونات

سيرورات الانحلالي (الهيموليزين). لتربية syrovatka 3 مرات أقل من العنوان (div. P. 211). استعد للتخفيف من syrovatki لجميع المعلومات التي يمكن الحصول عليها بضرب حجم syrovatka في عينة واحدة (على سبيل المثال ، 0.5 مل) بعدد أنابيب الاختبار ، سيغير تروشي عدد їх في الإدخال.

2 الكبش Erіtrotsty. تحضير معلق بنسبة 3٪ من كريات الدم الحمراء في الكبش (div. P. 211) لكامل عدد أنابيب الاختبار في الجرعة. لتحضير الجهاز الانحلالي قبل 30 دقيقة من إدخال كمية الهيموليسين المخفف وتعليق خلايا الدم ، أضف الشراب إلى خلايا الدم ، ثم قم بإعادة لف كمية 37.

3. من السهل تكاثر المكمل 1:10. قبل الجرعة الجلدية لمعايرة yogo obov'yazkovo. عيار المكمل هو أقل عدد ، عند إضافته إلى الجهاز الانحلالي ، يحدث انحلال دم إضافي لمدة سنة واحدة عند 37 ˚. يتم تقديم مخطط المعايرة التكميلية في الجدول 21.

اواغا! لمعايرة مجاملة بهذه الطريقة ، والتي يتم بها وضع المعلومات الرئيسية ، لتحل محل الانهيار الفسيولوجي في النهار.

Oblik النتائج. في الضوابط ، من البريء إحداث آثار لانحلال الدم ، حيث لا يوجد في أحدها مكمل ، في الآخر - الهيموليزين. التحكم للإشارة إلى وجود المكونات في تفاعل السمية الدموية (القدرة على تحلل كريات الدم الحمراء تلقائيًا).

عند النقطة في الجدول. 21 أضف عيارًا لتكملة المخفف من 1:10 إلى 0.15 مل. لمدة ساعة للتجربة ، يمكن تقليل نشاط المكمل للامتصاص غير المحدد للمكونات الأخرى للتفاعل ، لذلك من أجل القبول يمكن زيادة عدد من المكملات: خذ جرعة للعيار. Tse هي جرعة عمل. المؤخرة الموجهة لديها 0.2 مكمل بتخفيف 1:10. لذلك ، نظرًا لأن جميع المكونات التي تشارك في RSK مذنبة بأخذها في ryvnyh Obsyagy (في تطبيقنا ، لدينا توصيل 0: 5 مل) ، من الضروري إضافة 0.3 مل من وردة فائقة النعومة إلى جرعة مكملة من (0.2 مل إلى 1:10). لجميع النصائح للعناية بالبشرة منها (ورد مكمل و izotonic.

للحصول على جميع المعلومات حول الجلد ، قم بضربها في عدد أنابيب الاختبار ، والتي ستشارك في RSK. على سبيل المثال ، لإجراء الفحص في 50 أنبوبًا ، من الضروري تناول 10 مل من المكمل 1:10 (0.2 مل × 50) و 15 مل من الورد متساوي التوتر (0.3 مل × 50).

4. يكون المستضد جاهزًا لتلقي المستحضر من العيار المعطى ، بنفس المقدار ، إذا كان تخفيف المستضد مذنباً بالانتقام في 1 مل. على سبيل المثال ، عند عيار 0.4 ، قم بتخفيف 0.96 مل من الورد متساوي التوتر. آخذ جزءًا من المستضد من الجرعة ، وهو نصف العيار (0.5 مل). تسي هو جرعة العمل. يبدو أنه تم تخفيف المستضد لجميع المعلومات ، بضرب 0.5 مل في عدد الأنابيب في الاختبار.

5. الجسم المضاد هو شخص مريض. أنا svіzhu sirovatku قبل القبول للعمل ، لإضافة مكمل لـ nіy. لكامل البرنامج 30 دقيقة عند 56 درجة مئوية في حمام مائي أو في معطل مع ترموستات. الطريقة المتبقية أكثر جمالا: من الممكن زيادة سخونة الطعام ، أي أنه تم تغيير طبيعته. التفسيرات غير مقبولة. يجب أن يركد سيروفات المريض في المخفف من 1:10 إلى 1: 160.

الجدول رقم 14

غالبًا ما تستخدم العقول والنشطاء المارقة النساء المحصنات. Їх لتربية 1:50 فيش.

يتم تحضير جميع المكونات بفائض صغير.

الجدول رقم 15

إجراء المعاينة الرئيسية

عندما يتم تنظيمه ستراه في المنطقة. اتساق المكونات الإضافية مهم. يجب أن يتم تنفيذ Doslid على مرحلتين.

المرحلة الأولى في أنبوب الاختبار ، صب الكمية المطلوبة من كلوريد الصوديوم متساوي التوتر ، ثم - الصيانة اللازمة للشراب المخفف ، وبنفس الطريقة ، جرعة العمل من المستضد والمكمل. قبل أن تشرف obov'yazkovo على التحكم في الكل والمشاركة في المكونات الجديدة: syrovatka ، المستضد ، أنظمة الانحلالي والمكملات.

يتم إعادة سحق أنابيب الاختبار واحتضانها عند 37 درجة مئوية 45 xv-1 سنة أو عند 4 درجات مئوية ("RSC في البرد") 18 ساعة في الساعة. إجراء تفاعل "في البرد" مهم لزيادة الحساسية والنوعية.

المرحلة الثانية. عند الانتهاء من الحضانة ، أضف 1 مل من الجهاز الانحلالي إلى الأنابيب ، والتي يتم تزجيجها أمام منظم الحرارة لمدة 30 دقيقة (توعية). يجب سحق أنابيب الاختبار ووضعها في منظم الحرارة مرة أخرى.

Oblik النتيجة في. يتم وضع الأنابيب في منظم الحرارة من أجل انحلال الدم الثانوي في أنابيب الاختبار الثاني والثالث والسادس والسابع (التحكم في syvate ومستضد ومكمل لكل جرعة أو جرعتين). أولاً بالنسبة لجميع حالات انحلال الدم ، تكون في الاختبار السابع ، حيث يوجد مقدار ثانوي من المكمل. من أجل التأكد من حدوث انحلال الدم أثناء الاختبار ، وفي المقام الأول سنكون قادرين على التمييز ، من الضروري اتباع هذه الضوابط باحترام بشكل خاص. ياك ريدينا فقط في أنابيب الاختبار الثاني والثالث والسادس يحدق بلمحة ، - قم بإزالة الحامل ثلاثي القوائم بشكل غير دقيق من أنابيب الاختبار من منظم الحرارة. حول أولئك الذين لم يتم إخطارهم في منظمات الحرارة أكثر ، ليس من الضروري التحدث عن مظهر من مظاهر kalamut السهل (انحلال الدم غير الملحوظ) في الاختبار الخامس - فقط نصف جرعة العمل من انحلال الدم التكميلي والثانوي في الإنتاج الصحيحلا استطيع ان اقول لكم.

يتم تطبيق انحلال الدم في التحكم في العينة والمستضد (أنابيب الاختبار 2 و 3) لأولئك الذين جرعتهم بشكل صحيح وعلى هذا النحو ، لا تربط المستضد التكميلي.

في السيطرة على أنظمة الانحلالي (أنبوب الاختبار 4) عند її الروبوت الصحيحإنه بريء من إحداث انحلال الدم - في إنزيم جديد.

بعد تجاوز حقيقة أن عناصر التحكم مرت بشكل صحيح ، من الممكن العودة إلى الباب. تم تأكيد معدل انحلال الدم في أنابيب الاختبار كنتيجة إيجابية للتفاعل. من الضروري الإبلاغ عن تلك الموجودة في الأجسام المضادة لـ syrovattsi الخاصة بالمستضد المأخوذ. التأكيدات من قبلهم لها معقد من ربط مكمل والتحول إلى مشاركتهم في تفاعل انحلال الدم. حتى في أنابيب الاختبار السابقة يوجد انحلال دم ، يتم تقييم نتيجة التفاعل على أنها سلبية. في هذه الحالة ، لا يوجد دليل على وجود مستضد أو جسم مضاد ، والمكمل غير ملزم ويشارك في تفاعل انحلال الدم.

بالتوازي مع الشخص المريض ، ضع نفس الجرعة مع Syrovate إيجابي إيجابي (أي مع مستضد ، يكون فيه مستضد لمستضد معين) وجرعة سلبية إيجابية ، حيث يوجد عدد قليل من المستضدات المحددة. مع الإعداد الصحيح للتقرير ، فإن المشكلة الأولى ناتجة عن انحلال الدم ، والأخرى بسبب انحلال الدم.

شدة التفاعل كما يلي:

بوفنا متداخلة انحلال الدم. توافق الكريات الحمر على rіvnomіrnu kalamut أو تغرق في القاع. في vipadku rіdin كله في probіrtsі stє bezbarvnoy ؛

تحلل حوالي 25٪ من كريات الدم الحمراء. الحصار أقل ، والمسافة فوقه قرنية قليلاً. تم تقييم نتيجة RSK أيضًا على أنها إيجابية للغاية ؛

تحلل ما يقرب من 50٪ من كريات الدم الحمراء. الحصار ، ريدينا روزيفا. نتيجة إيجابية لـ RSK ؛

تحلل حوالي 75٪ من كريات الدم الحمراء. حصار ضئيل ، تم حظر اللغز بشكل مكثف. النتيجة الإجمالية RSK.

تحلل جميع كريات الدم الحمراء. Ridina ممنوع بشكل مكثف وواضح تمامًا. نتيجة RSK سلبية.